两种末端标记的寡聚核苷酸探针的比较研究

本文利用α-³²P]-dATP 和 γ-³²P]-ATP分别对寡聚核苷酸的3’-末端及5’-末端进行标记,研究这两种标记方法的技术途径,并结合斑点杂交,比较这两种末端标记的探针的灵敏度及特异性。结果表明:α-³²P]-dATP虽可在寡聚核苷酸的3’-OH末端标上多个³²P]-dAMP分子,但所得标记探针的杂交灵敏度及杂交体的稳定性均不及γ-³²P]-ATP标记5’-末端制备的寡聚核苷酸探针。因此,当实验需要极高灵敏度的寡聚核苷酸探针时,以选择γ-³²P]-ATP标记其5’-末端为宜。