| 肠道病毒68型新型中和试验方法的建立及其初步应用 |
| |
| 引用本文： | 万俊凯,王玮,侯汪衡,李姝璇,赵欢,郑清炳,何水珍,程通,夏宁邵.肠道病毒68型新型中和试验方法的建立及其初步应用[J].病毒学报,2017,33(5):661-667. |
| |
| 作者姓名： | 万俊凯 王玮 侯汪衡 李姝璇 赵欢 郑清炳 何水珍 程通 夏宁邵 |
| |
| 作者单位： | 国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门大学生命科学学院,厦门361102;分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室,厦门大学公共卫生学院,厦门361102;国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心,厦门大学生命科学学院,厦门361102;分子疫苗学和分子诊断学国家重点实验室,厦门大学公共卫生学院,厦门361102;厦门市疾病预防与控制中心,厦门,361021 |
| |
| 摘 要： | 针对肠道病毒68型(EV-D68)建立一种新型快速、高效的中和试验方法,并初步评价其在EV-D68流行病学研究中的应用价值。以灭活EV-D68病毒免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤技术制备其单克隆抗体;筛选反应性好、特异性强的抗EV-D68单克隆抗体作为检测抗体,基于酶联免疫斑点检测技术(ELISPOT)建立EV-D68高效中和试验方法;进一步比较该方法与传统中和试验方法 Nt-CPE的一致性,并使用该方法对临床血清样本进行检测。共获得10株分泌抗EV-D68单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取一株性能最优的15C5进行生产纯化,鉴定其为IgG3亚型;以15C5为检测抗体,建立了快速检测EV-D68中和抗体的Nt-ELISPOT方法;与Nt-CPE方法比较,Nt-ELISPOT方法将检测时间由5~7d缩短至1d以内,并且两种方法检测结果一致性良好;应用所建立的Nt-ELISPOT方法对厦门地区146份人群血清样本进行检测,显示血清样本EV-D68中和抗体阳性率为98.6%(144/146),提示厦门地区可能存在过EV-D68的流行。本研究基于ELISPOT建立的新型EV-D68中和试验方法快速可靠,适合通量检测,可以应用于EV-D68中和抗体水平的血清学调查,为EV-D68感染的防控工作提供帮助。
|
| 关 键 词： | 肠道病毒68型(EV-D68) 中和试验 中和抗体 血清检测 |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
