| 改构的野生革耳漆酶基因在毕赤酵母中的表达和活性鉴定 |
| |
| 引用本文： | 杨建强,刘刚,汤国营,戴红梅,朱厚础.改构的野生革耳漆酶基因在毕赤酵母中的表达和活性鉴定[J].生物技术通讯,2005,16(3):255-258. |
| |
| 作者姓名： | 杨建强 刘刚 汤国营 戴红梅 朱厚础 |
| |
| 作者单位： | 军事医学科学院,生物工程研究所,北京,100071 |
| |
| 摘 要： | 在野生革耳漆酶的cDNA序列3’端添加15个核苷酸后得到突变基因lccT。将其克隆入表达载体pPICZαA，重组质粒pPICZαA／lccT经PmeⅠ线性化，电击转化毕赤酵母X-33细胞。经过菌落PCR鉴定的转化子pPICZαA／lccT—X一33在甲醇诱导后分泌表达活性重组漆酶LCCT，比未添加该段序列的野生革耳漆酶基因lcc在毕赤酵母中表达的活性提高2倍多。其培养液上清经凝胶过滤层析和离子交换层析后，得到了电泳纯的漆酶蛋白，以ABTS为底物在pH4．5时测得比活为3．68U／mg。根据SDS-PAGE测定的重组漆酶LCCT的表观相对分子质量为62600。
|
| 关 键 词： | 毕赤酵母 酶基因 活性鉴定 野生 SDS-PAGE cDNA序列 离子交换层析 凝胶过滤层析 相对分子质量 PCR鉴定 突变基因 表达载体 重组质粒 X-33 电击转化 活性重组 分泌表达 ABTS 核苷酸 漆酶 线性化 Pme 转化子 lcc 培养液 酶蛋白 |
| 文章编号： | 1009-0002(2005)03-0255-04 |
| 修稿时间： | 2005年1月29日 |
Expression and Purfication of the Modified Gene of Laccase from Panus rudis in Pichia pastoris |
| |
| YANG Jian-qiang,TANG Guo-ying,DAI Hong-mei,LIU Gang,ZHU Hou-chu.Expression and Purfication of the Modified Gene of Laccase from Panus rudis in Pichia pastoris[J].Letters in Biotechnology,2005,16(3):255-258. |
| |
| Authors: | YANG Jian-qiang TANG Guo-ying DAI Hong-mei LIU Gang ZHU Hou-chu |
| |
| Institution: | YANG Jian-qiang,TANG Guo-ying,DAI Hong-mei,LIU Gang,ZHU Hou-chu Institute of Biotechnology,Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100071,China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Panus rudis laccase modification expression Pichia pastoris |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
