甜味蛋白thaumatin基因转入烟草的研究

利用基因工程技术，将分别克隆在两个不同载体上的甜味蛋白thaumatin cDNA基因片段连接成一个完整的cDNA基因，并将该基因克隆进pBI121，构建成表达载体pBI121-tha。通过冻融法导入农杆菌，农杆菌介导叶盘法转入烟草，经过组培，得到转基因的植株。提取转基因烟草总DNA，经PCR，PCR—Southern和Southern杂交证实，甜味蛋白基因已整合到烟草基因组中。RT—PCR结果证明，thaumatin基因已在转基因烟草中转录成mRNA，但SDS—PAGE和甜味尝试都表明thaumatin基因在转基因烟草中没有表达出甜味蛋白。