| 肠道病毒、乙脑病毒和腮腺炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 孔祥军,申镇维,陈虎,赵连利,于庆杰,姬春雪,李宝辉,吴蕊.肠道病毒、乙脑病毒和腮腺炎病毒多重RT-PCR检测方法的建立[J].生命科学研究,2013,17(2):136-142. |
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| 作者姓名： | 孔祥军 申镇维 陈虎 赵连利 于庆杰 姬春雪 李宝辉 吴蕊 |
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| 作者单位： | 沧州市中心医院,中国河北沧州,061001 |
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| 基金项目： | 河北省沧州市科学技术研究与发展计划项目(项目编号：1123010ZD) |
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| 摘 要： | 为建立针对肠道病毒(enterovirus,EV)、乙脑病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)和腮腺炎病毒(mumps virus,MUV)的多重RT-PCR检测方法,分别选择肠道病毒的5′UTR基因、乙脑病毒的E基因和腮腺炎病毒M基因设计3对引物,建立同时检测肠道病毒、乙脑病毒和腮腺炎病毒的多重RT-PCR方法.以中国地区流行的与脑炎相关的麻疹病毒和风疹病毒cDNA为模板验证该检测方法的特异性,同时以梯度稀释的不同滴度的脊髓灰质炎病毒、乙脑病毒、腮腺炎病毒评估该检测方法的检出限.所建立的3种病毒的多重RT-PCR方法可同时或分别特异扩增肠道病毒、乙脑病毒和腮腺炎病毒的152 bp、429 bp和274 bp基因片段,基因序列分别与脊髓灰质炎病毒Sabin 1型5′UTR基因片段、乙型脑炎病毒SA-14-14-2株E基因片段及腮腺炎病毒S79基因片段序列一致;检出限分别达到78.1 CCID50/mL、312.5 PFU/mL、156.2 CCID50/mL;而对麻疹病毒和风疹病毒的扩增均为阴性.所建立的多重RT-PCR特异性和检出限良好,可用于上述3种脑炎病毒的快速检测.
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| 关 键 词： | 多重RT-PCR 肠道病毒 乙脑病毒 腮腺炎病毒 病毒性脑炎 |
Design and Construction of Multiplex RT-PCR Diagnostic Methods for Enterovirus, Japanese Encephalitis Virus and Mumps Virus |
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| KONG Xiang-jun,SHEN Zhen-wei,CHEN Hu,ZHAO Lian-li,YU Qing-jie,JI Chun-xue,LI Bao-hui,WU Rui.Design and Construction of Multiplex RT-PCR Diagnostic Methods for Enterovirus, Japanese Encephalitis Virus and Mumps Virus[J].Life Science Research,2013,17(2):136-142. |
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| Authors: | KONG Xiang-jun SHEN Zhen-wei CHEN Hu ZHAO Lian-li YU Qing-jie JI Chun-xue LI Bao-hui WU Rui |
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| Institution: | (Cangzhou Central Hospital,Cangzhou 061001,Hebei,China) |
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