| hnRNPA1基因在家蚕翅原基组织中的表达与定位分析 |
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| 引用本文： | 张康,冯启理,邓惠敏.hnRNPA1基因在家蚕翅原基组织中的表达与定位分析[J].环境昆虫学报,2019,41(2):343-351. |
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| 作者姓名： | 张康 冯启理 邓惠敏 |
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| 作者单位： | 华南师范大学生命科学学院, 华南师范大学昆虫科学与应用研究所, 广州市昆虫发育调控与应用重点实验室, 广州510631;华南师范大学生命科学学院, 华南师范大学昆虫科学与应用研究所, 广州市昆虫发育调控与应用重点实验室, 广州510631;华南师范大学生命科学学院, 华南师范大学昆虫科学与应用研究所, 广州市昆虫发育调控与应用重点实验室, 广州510631 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金;广东省自然科学基金 |
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| 摘 要： | 核不均一蛋白A1(hnRNPA1)是一个重要的RNA结合蛋白。本研究旨在获得家蚕hnRNPA1基因的cDNA,并对其在家蚕翅原基组织进行表达和定位分析。以家蚕幼虫期翅原基mRNA为模板通过反转录克隆家蚕BmhnRNPA1基因的全长cDNA,并对其进行生物信息学分析。构建pET32a-BmhnRNPA1蛋白表达载体,表达且纯化得到BmhnRNPA1重组蛋白,并制备该蛋白多克隆抗体,通过实时荧光定量RT-PCR、Western blot和免疫组化方法检测BmhnRNPA1在家蚕幼虫和蛹翅原基组织中的表达与定位。克隆得到了家蚕hnRNPA1基因的全长cDNA片段,其开放阅读框(ORF)序列为951 bp,编码316个氨基酸,预测分子量为34.98 kDa,等电点为5.15。编码蛋白在第18～90个氨基酸和109～181个氨基酸处为保守的RRM结构域。系统进化分析显示,家蚕hnRNPA1与小菜蛾hnRNPA1的亲缘关系最近。QRT-PCR结果显示,BmhnRNPA1在家蚕幼虫和蛹期的翅原基组织中均有表达,且在蛹期第3天的表达量达到峰值。Western blot进一步证实了实验结果。免疫组化分析结果显示,该蛋白存在于翅原基组织中,并定位于细胞核内。家蚕BmhRNPA1具有两个RNA结合结构域,属于hnRNPs家族,定位于细胞核内,表明其可能参与mRNA的选择性剪接作用。本研究结果为进一步探索该基因的功能提供了基础。
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| 关 键 词： | 家蚕 hnRNPA1 基因表达 免疫组化 RNA剪接 |
Study on expression and localization of hnRNPA1 in the wing disc of silkworm,Bombyx mori |
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| ZHANG Kang,FENG Qi-Li,DENG Hui-Min.Study on expression and localization of hnRNPA1 in the wing disc of silkworm,Bombyx mori[J].Journal of Environmental Entomology,2019,41(2):343-351. |
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| Authors: | ZHANG Kang FENG Qi-Li DENG Hui-Min |
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| Institution: | (School of Life Sciences,South China Normal University,SCNU-Institute of Insect Science and Technology,Guangzhou Key Laboratory of Development Regulation and Application Research of Insects,Guangzhou 510006,China) |
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| Abstract: | ZHANG Kang;FENG Qi-Li;DENG Hui-Min(School of Life Sciences,South China Normal University,SCNU-Institute of Insect Science and Technology,Guangzhou Key Laboratory of Development Regulation and Application Research of Insects,Guangzhou 510006,China) |
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| Keywords: | Silkworm hnRNPA1 gene expression immunohistochemistry RNA splicing |
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