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玉米螟P450基因cDNA的克隆及植物次生物质对其诱导表达
引用本文:张雨良,曾洪梅,杨秀芬,杨峰山,刘
华,
尹富仕,毛建军,邱德文.玉米螟P450基因cDNA的克隆及植物次生物质对其诱导表达[J].中国生物化学与分子生物学报,2009,25(2):126-131.
作者姓名:张雨良  曾洪梅  杨秀芬  杨峰山  
华
  
尹富仕
  毛建军  邱德文
作者单位:中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京;100081;;新疆农业大学农学院,新疆农业大学农业生物技术重点实验室,乌鲁木齐830052;;黑龙江大学生命科学学院,黑龙江省高校微生物学重点实验室,哈尔滨;150080
摘    要:昆虫细胞色素P450是一类在生物代谢中起重要作用的基因家族,承担着许多重要的生 理功能,包括对植物次生物质代谢和杀虫剂解毒等.本研究以玉米螟5龄幼虫中肠的总RNA为 模板,根据不同昆虫P450基因家族保守氨基酸序列,设计并合成简并引物,利用RT-PCR扩 增出了玉米螟细胞色素P450基因cDNA片段,将其克隆到pMD19 T载体进行序列测定.测序获得了编码213个氨基酸残基的641 bp的DNA片段,命名为OfP450(GenBank登录号:EU807990) ;与已公布的棉铃虫、家蚕、欧洲防风草结网毛虫、小菜蛾和黑腹果蝇等的细胞色素P450氨基酸序列进行比较,其一致性分别为55%、50%、49%、44%和31%.将植物次生物质棉酚、丁布添加入人工饲料中,对玉米螟进行了饲喂实验,采用优化半定量RT-PCR,以18S rRNA为内标,RT-PCR检测进食棉酚、丁布植物化合物的玉米螟中肠P450基因的转录. 结果表明,其转录水平能被棉酚、丁布显著诱导. 提示本实验克隆的玉米螟细胞色素P450对植物次生物质的代谢作用与P450表达量呈正相关.该研究为下一步将植物介导的RNA干扰技术应用于害虫生物防治提供坚实的基础.

关 键 词:玉米螟  P450基因  克隆  植物次生物质  诱导表达  
收稿时间:2008-8-7
修稿时间:2008-10-6

Cloning of Ostrinia furnacalis P450 Gene cDNA and InducibleExpression of Secondary Plant Metabolite
ZHANG Yu-Liang,ZENG Hong-Mei,YANG Xiu-Fen,YANG F eng-Shan,LIU Hua,YIN Fu-Shi,MAO Jian-Jun,QIU De-Wen.Cloning of Ostrinia furnacalis P450 Gene cDNA and InducibleExpression of Secondary Plant Metabolite[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2009,25(2):126-131.
Authors:ZHANG Yu-Liang  ZENG Hong-Mei  YANG Xiu-Fen  YANG F eng-Shan  LIU Hua  YIN Fu-Shi  MAO Jian-Jun  QIU De-Wen
Institution: Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Beijing 100081,China;   College of Agronomy,Xinjiang Agricultural University, Key Laboratory of Agricultural Biotechnology, Urumqi 830052, Xinjiang,China;  College of Life Sciences,Heilongjiang University,
Key Laboratory of Heilongjiang Microbiology, Harbin 150080, Heilongjiang, China
Abstract:
Keywords:Ostrinia furnacalis  P450 gene  clone  secondary plant metabolite  in ducible expression
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