全文获取类型
收费全文 | 4519篇 |
免费 | 256篇 |
国内免费 | 1783篇 |
出版年
2024年 | 31篇 |
2023年 | 110篇 |
2022年 | 115篇 |
2021年 | 134篇 |
2020年 | 123篇 |
2019年 | 164篇 |
2018年 | 119篇 |
2017年 | 162篇 |
2016年 | 158篇 |
2015年 | 204篇 |
2014年 | 312篇 |
2013年 | 247篇 |
2012年 | 267篇 |
2011年 | 365篇 |
2010年 | 291篇 |
2009年 | 302篇 |
2008年 | 438篇 |
2007年 | 291篇 |
2006年 | 245篇 |
2005年 | 258篇 |
2004年 | 189篇 |
2003年 | 247篇 |
2002年 | 194篇 |
2001年 | 203篇 |
2000年 | 158篇 |
1999年 | 171篇 |
1998年 | 129篇 |
1997年 | 117篇 |
1996年 | 118篇 |
1995年 | 93篇 |
1994年 | 102篇 |
1993年 | 87篇 |
1992年 | 94篇 |
1991年 | 86篇 |
1990年 | 80篇 |
1989年 | 56篇 |
1988年 | 22篇 |
1987年 | 10篇 |
1986年 | 17篇 |
1985年 | 20篇 |
1984年 | 10篇 |
1983年 | 11篇 |
1982年 | 2篇 |
1981年 | 3篇 |
1975年 | 1篇 |
1963年 | 1篇 |
1950年 | 1篇 |
排序方式: 共有6558条查询结果,搜索用时 656 毫秒
1.
2.
为建立一种能够快速、灵敏、特异的检测甘蔗杆状病毒(sugarcane bacilliform virus, SCBV)的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法,针对SCBV的基因序列,设计了特异性扩增引物,利用构建的标准品建立和优化针对SCBV的荧光定量PCR检测方法,并对该方法进行了特异性、稳定性、灵敏性等的测试,随后用于田间样品的检测。结果表明:将含有SCBV基因组序列的重组质粒进行梯度稀释制成标准品,利用标准品进行荧光定量PCR,获得标准曲线y=-3.482 1x+37.264,相关系数r~2=0.999 9,说明CT值与反应起始模板数量呈线性关系,可进行准确定量;组内和组间变异系数在0.19%~1.68%之间,表明检测方法重复性良好;建立的荧光定量PCR方法最低可检测到10个拷贝重组质粒/μL,是常规PCR检测灵敏度的100倍。使用建立的荧光定量PCR方法和常规PCR方法对采集的90份甘蔗叶片样品进行检测,常规PCR检出53份阳性样品,荧光定量PCR检出56份阳性样品,表明所建立的荧光定量PCR方法较常规PCR敏感性高,且准确性高。本研究建立的SCBV荧光定量PCR检测方法重复性好,灵敏度高,为构建甘蔗健康种苗体系提供了一种高效检测方法。 相似文献
3.
4.
《微生物学免疫学进展》2016,(5)
目的探讨间苯二酚显色法测定唾液酸含量的影响因素,保证试验结果的一致性和准确性。方法按照《中国药典》2015版(三部)规定的唾液酸含量测定方法,分析单糖和二糖、载体蛋白质、不同溶液及化学试剂对该方法测定结果的影响;比较加热时间、加入有机相后的放置时间对检测结果的影响。结果选用的不同单糖和二糖中,蔗糖对试验的影响最大,低中高浓度时吸光值分别为0.065、0.196、0.420;其次是核糖,3种浓度的吸光值分别为0.037、0.113、0.187;高浓度的半乳糖、葡萄糖和乳糖的吸光值在0.02左右,对试验结果有一定影响,低浓度时对试验的影响可以忽略不计。N-乙酰甘露糖胺在低中高浓度时对结果均无影响。破伤风类毒素、重组绿脓杆菌外毒素A、小牛血清白蛋白、白喉类毒素对检测结果无影响,在500μg/m L质量浓度时吸光值均在0.008以下。选用的不同溶液对试验均无影响。选用的化学试剂中乙醇、低浓度的碳二亚胺以及己二酰肼对试验结果均无干扰,丙酮和脱氧胆酸钠均会对试验造成较大影响。反应液的吸光值随着加热时间的延长而增加,吸光值随着放置时间的延长而降低;第一小时内吸光值下降9%左右。结论在质控过程中,这些外源物质及操作过程对唾液酸含量测定结果有一定影响,应严格按照质量控制标准执行操作。 相似文献
5.
6.
7.
除草剂的生物发光测定法 总被引:1,自引:0,他引:1
在防止自然环境的污染中对土壤与水域中除草剂含量的监测是必不可少的。这种监测需要灵敏快速的分析方法,Tcban等曾用生物发光测定杀藻剂(Algicide)与除草剂,也有人将生物发光应用于物质的毒性分析。本文介绍应用生物发光测定除草剂的技术方法。 相似文献
8.
青霉素敏感的酶场效应晶体管的研究和应用 总被引:1,自引:1,他引:0
酶场效应晶体管(ENFET)是近年来发展起来的一类半导体技术和生物技术相结合的新型器件。双管差分输出式ENFET对环境温度变化及总体pH变化等外界因素有自动补偿作用,其输出电压随时间的漂移较之单管输出有很大的改善。此外,还可采用金电极作参比电极以实现探头的小型化。青霉索ENFET在0.01mol/L和O.02m01/L的磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为6.5—7.0mV/mmol/L和3.2—3.6mV/mmol/L,线性范围为0.5—14mmol/L和0.5—25mm0l/L。当浸于O.Olmol/L磷酸缓冲液、置于4℃下保存时,探头的贮存寿命大于6个月。探头的累计使用次数可超过1000次。本文还论述了青霉素ENFET在青霉素发酵液浓度
测定中的应用。 相似文献
9.
用荧光染色与冬青油透明技术显示花粉细胞核 总被引:1,自引:0,他引:1
杨弘远 《植物学报(英文版)》1988,30(3):242-247
花粉经Hoechst 33258(H33258)染色、乙醇脱水、冬青油(水杨酸甲酯)透明后,荧光镜检可透视到其中的生殖核(或精核)及营养核,冬青油能保存H33258荧光,减弱花粉壁自发荧光,增加花粉内含物透明度,因而观察效果比不透明时显著改进,用此法观察人工萌发的花粉管,可显示细胞核由花粉粒向花粉管转移的过程及其在花粉管中的动态变化。 相似文献
10.
大肠杆菌galK基因与gPt基因在爪蟾卵母细胞中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
把含有E.Coil gal K基因和gpt基因的几种重组质粒显微注射到爪蟾(Xencpus Laevis)卵母细胞的核中,用淀粉凝胶电泳检测到了细菌基因的表达产物。E.Coli gal K基因和gpt基因在爪瞻卵母细胞中的表达依赖于SV40病毒早期启动子的存在,而小鼠β-珠蛋白启动子在爪蟾卵母细胞中缺乏活性。此外,增强子在爪蟾卵母细胞中对细菌基因的活性有较为明显的增强作用。 相似文献