HM0332和HM48-3菌株纯培养条件下解磷强度研究

室内研究结果说明,解磷细菌ＨＭ０３３２和ＨＭ４８－３菌株以磷矿粉为磷源,在纯培养条件下产生有机酸,分解转化磷矿粉,有效磷转化率即解磷强度分别为８．２８％和７．２６％。     

HM0332和HM48—3菌株纯培养条件下解磷强度研究

室内研究结果说明,解磷细菌ＨＭ０３３２和ＨＭ４８－３菌株以磷矿粉为磷源,在纯培养条件下产生有机酸,分解转化磷矿粉,有效磷转化率即解磷强度分别为８．２８％和７．２６％。     

4株溶磷细菌和真菌溶解磷矿粉的特性

溶磷微生物广泛地分布在土壤,根际等生态环境中,了解这些微生物溶解难溶性磷酸盐如磷矿粉的特性,对于开发利用这些微生物,提高磷素利用效率具有重要作用,研究发现;真菌比细菌溶解磷矿粉的能力要强得多,培养基中的铁,镁,锰,钠等成分可以提高真菌的溶磷量,但降低了细菌的溶磷量,培养基中磷矿粉用量越高,溶磷量越低;碳源物质浓度高于3%将显地降低溶磷量,微生物能够破坏磷矿粉的结构。使其中的磷在以后的培养过程中更加容易释放出来,可见利用微生物活化磷矿粉中的磷,具有良好前景。     

有机活化剂对磷矿粉活化效果研究

研究以沙田柚为例的果树施用经有机活化剂活化处理磷矿粉的效果,结果表明,施用活化处理磷矿粉的轴树在各生育期的叶片养分状况比施用过磷酸钙和钙镁磷肥的好,所以在各时期的农艺性状表现良好,产量较高,在适当时期补充中微量元素可使沙田柚高产优质。研究结果显示,果树可直接和一年一次施用价格低廉的磷矿粉,采用活化技术可使磷矿粉的肥效超过磷酸钙和钙镁磷肥,从而可大幅度地降低果园的肥料和施肥用工费而降低生产成本,同时又可减少因施肥过量和磷肥生产而造成的浪费和环境污染,还可使造纸废液开发产品的利用而使工业废物作为资源利用而减少它的二次污染。     

香蕉根际土壤解磷细菌的筛选、鉴定及解磷能力

【目的】以磷矿粉为难溶态磷,以期从香蕉根际土壤筛选出高效的解磷细菌。【方法】采用透明圈法和钼锑抗比色法分离筛选解磷细菌,通过形态学特征、生理生化试验结合16S rRNA基因序列分析及系统发育树比对鉴定其种属,并利用单因素试验方法研究不同碳源、氮源及C/N比值(40:1、20:1和8:1)对菌株溶解磷矿粉能力的影响。研究不同菌株解磷能力和培养介质pH值的变化关系。【结果】分离具有解磷能力的细菌8株,筛选出具有代表性的3个菌株B3-5-6、M-3-01和T1-4-01,初步鉴定菌株B3-5-6为嗜气芽孢杆菌(Bacillus aerophilus),M-3-01为虫内生沙雷氏菌(Serratia nematodiphila),T1-4-01为艾博丽肠杆菌(Enterobacter asburiae)。B3-5-6解磷能力与介质pH值之间存在线性负相关性(|r|=0.949 66>0.735),其相关性达到极显著水平;B3-5-6在碳源为蔗糖、氮源为(NH4)2SO4、C/N为40:1,M-3-01在碳源为葡萄糖、氮源为(NH4)2SO4、C/N为20:1,T1-4-01在碳源为乳糖、氮源为蛋白胨、C/N为20:1条件下解磷效果较好。解磷效果与初筛相比分别提高了1.12、1.17、2.55倍。【结论】不同的碳氮源、C/N值会直接影响磷细菌的解磷能力;筛选出一株解磷能力与培养介质pH之间存在着极显著相关性的细菌,其解磷机理有待进一步研究。     

溶磷真菌ATMT转化条件优化及其对矮牵牛的促生效果评价

【目的】建立和优化一株溶磷真菌咖啡果小蠹青霉菌Penicilliumbrocae的转化体系,并利用分子标记观察其在根部的定殖;检测接种咖啡果小蠹青霉菌对植物的促生作用,为菌肥的研发奠定基础。【方法】利用农杆菌介导的转化体系(Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation,ATMT)获得转化子并优化转化条件,结合插入片段携带的分子标记进行转化子验证和根部定殖研究,同时利用TAIL-PCR(thermalasymmetricinterlaced-PCR)锚定插入位点序列信息;通过矮牵牛盆栽实验,设置T1(10mL水)、T2(10g/L磷矿粉,10mL)、T3(106个/mL孢子,10 mL)和T4 (10 g/L磷矿粉+106个/mL孢子,10mL)4个处理,探究P.brocae对植物的促生作用。【结果】利用优化后的ATMT体系可获得44个转化子/106个孢子,通过标记基因hyg和gfp的克隆以及GFP荧光观察和GUS染色结果验证了转化子,并利用GUS标记观察到了菌株在矮牵牛根部的定殖情况;利用TAIL-PCR克隆了一株溶磷能力有较显著降低的转化子上插入位点一端的侧翼序列,并确定了插入位点的位置;T4处理组鲜重较T1、T2和T3差异显著(P≤0.05),且分别高出35.4%、35.6%和21.4%,T1、T2和T3相互之间无显著差异。T4处理组干重较T1、T2以及T3也有显著差异(P≤0.05),且分别高出25.1%、37.8%和26.0%,T1、T2和T3之间亦无显著差异。【结论】本研究优化了P. brocae的ATMT体系并观察到了转化子在矮牵牛根表的定殖;磷矿粉和P.brocae孢子共施能够显著促进矮牵牛幼苗的生长,但二者分别单独施用则无此效果,推测在二者共施情况下P. brocae可能提高了磷矿粉的肥效。     

微生物溶解磷矿粉能力与pH及分泌有机酸的关系

从玉米根际和非根际土壤中分离得到的 74株溶解磷矿粉的微生物 ,发现它们的溶磷能力差异很大 ,主要决定于菌株本身的特性 ,与其来源无关 ,真菌普遍比细菌要强。真菌的溶磷能力与其培养介质的 pH之间呈显著的负相关 ,但细菌的这种关系非常弱。二者都产生多种有机酸 ,真菌主要分泌草酸、丙二酸和乳酸 ,而细菌主要分泌草酸、酒石酸、丙二酸、乳酸和乙酸 ,不同菌株分泌有机酸的数量和种类差异很大 ,但溶磷量与有机酸总量或单个有机酸浓度之间 ,没有发现显著的相关性 ,唯独柠檬酸与真菌的溶磷量之间存在显著的相关性。说明不同菌株有完全不同的溶磷机理 ,可能多种机理并存。     

一株节杆菌溶解磷矿粉的动态

磷矿粉用量明显地影响节杆菌1TCRi7菌株对其溶解,随着磷矿粉用量的增加,溶磷率急剧下降,超过5 g/L,溶磷率不到0.1%,培养液的pH也随磷矿粉用量增加而升高,但菌体生长繁殖几乎不受磷矿粉用量的影响。振荡培养时,第1 d菌体繁殖量就达到高峰,pH也降至最低,同时表现出强烈的溶磷活力,但菌株的溶磷量并不与其生长量吻合,溶磷量第9 d才达到高峰,以后逐渐下降。培养过程中有机酸分泌发生交替变化,主要分泌乙酸和丙二酸。第1 d、第9 d和第15 d出现3个峰值,说明微生物利用了所分泌出来的有机酸,并发生了有机酸代谢的变化。     

不同碳源对三种溶磷真菌溶解磷矿粉能力的影响

通过液体培养法 ,对 3种溶磷真菌利用葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、淀粉和纤维素等碳源溶解宜昌产磷矿粉的试验 ,结果表明 ,菌株P2 3在供给葡萄糖时的溶磷能力最高 ,并在一定程度上能够利用长链碳源淀粉和纤维素为营养而溶磷 ;而高效溶磷菌株P6 6和P39溶磷的最佳碳源是果糖和麦芽糖 ,该两菌株利用淀粉和纤维素的溶磷效果很小 ,甚至不溶磷。 3种溶磷真菌培养滤液 pH值、可滴定酸含量与其溶磷量之间的相关性因菌株而异 ,差别很大。菌株P2 3培养滤液pH值、可滴定酸含量与其溶磷量之间相关性很低 ,但菌株P6 6和P39培养滤液pH值、可滴定酸含量与其溶磷量之间相关性却达到极显著水平 (P <0 0 1)。结果表明 ,不同碳源对溶磷菌溶解磷矿粉能力影响很大 ,分析推断 3种菌株产生的有机酸活化磷矿粉能力为P6 6>P39>P2 3。     

4株溶磷细菌和真菌溶解磷矿粉的特性*

溶磷微生物广泛地分布在土壤、根际等生态环境中 ,了解这些微生物溶解难溶性磷酸盐如磷矿粉的特性 ,对于开发利用这些微生物 ,提高磷素利用效率具有重要作用。研究发现 :真菌比细菌溶解磷矿粉的能力要强得多 ,培养基中的铁、镁、锰、钠等成分可以提高真菌的溶磷量 ,但降低了细菌的溶磷量。培养基中磷矿粉用量越高 ,溶磷量越低 ;碳源物质浓度高于 3 %将显著地降低溶磷量。微生物能够破坏磷矿粉的结构 ,使其中的磷在以后的培养过程中更加容易释放出来。可见利用微生物活化磷矿粉中的磷 ,具有良好前景。