杀念菌素/FR-008生物合成途径中转运基因fscTⅠ与fscTⅡ的功能

[目的]分析杀念菌素/FR-008生物合成途径中转运基因fscTⅠ和ficTⅡ的功能.[方法]构建转运基因fscTⅠ和fscTⅡ的敲除质粒pJTU4137,并通过接合转移和同源重组双交换的方法得到转运基因缺失突变株.转运基因fscTⅠ和ficTⅡ也被克隆到高拷贝质粒pJTU 1278上用于在链霉菌FR-008(Streptomyces sp.FR-008)的衍生菌株ZYJ-6中进行转运蛋白的过量表达.[结果]获得了转运蛋白缺失的双交换突变株LX10,发酵结果显示该突变株不再产生杀念菌素及其衍生物 ;过量表达转运蛋白的基因工程菌株LX11,其杀念菌素的产量约是对照菌株的1.5倍.[结论]体内遗传实验进一步证实FR-008生物合成途径中的fscTⅠ和fscTⅡ是ATP依赖的ABC转运基因,fscTⅠ与fscTⅡ的过量表达增加了杀念菌素的产量,为利用此方法提高其它多烯类抗生素的产量提供了例证.     

铜绿假单胞菌耐碳青霉烯类抗菌药机制

铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是医院内感染常见的条件致病菌,其耐药性日益严重,经常仅对碳青霉烯类抗菌药物(如亚胺培南、美洛培南、伊米培南和帕尼培南等)敏感.然而近年来,国内、外文献报道PA对碳青霉烯类抗菌药物耐药(RCPA)呈逐渐上升趋势,这些耐药菌同时还对氟喹诺酮类、氨基糖苷类等其他类型的多种抗菌药物耐药,成为临床治疗的难题.在北美、南美、欧洲和澳大利亚进行的统计显示PA对美罗培南耐药率为75.4%,其他地区的耐药率在62%～70%[1].     

ICU肾功能不全患者耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌的分布特征及耐药特性分析

目的:调查与分析重症监护病房(ICU,Intensive Care Unit)肾功能不全患者耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌的分布特征及耐药特性。方法:收集2015年2月到2017年12月入住我院ICU的合并肾功能不全的感染性患者标本46例,调查标本来源与患者的临床资料,分离鉴定病原菌并进行耐药特性分析。结果:46例患者中共分离出165株耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌,标本来源于尿液6例,痰液20例,血液4例,肺泡灌洗液10例,分泌物3例,胆汁3例。165株耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌对美罗培南、亚胺培南、厄他培南、头孢噻吩、头孢噻肟、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星的耐药率在80%以上,对哌拉西林/他唑巴坦、庆大霉素的耐药率在75%左右,对米诺环素、四环素、替加环素的耐药率均在40%以下。46例患者中,治愈16例,好转17例,无效13例,总有效率为71.74%;ICU平均住院天数为(11.48±2.11)d;总住院天数为(45.29±1.48)d,院内病死11例,病死率为23.91%。多因素Logistic回归分析结果显示深静脉置管置入(OR=1.893)、年龄≥65岁(OR=2.154)、使用碳青霉烯类抗菌药物(OR=2.041)为ICU肾功不全患者发生耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌感染的独立危险因素(P0.05)。结论:ICU肾功不全患者耐碳青酶烯类肺炎克雷伯菌多来源于痰液标本,对米诺环素、四环素、替加环素的耐药性低,在临床上可以选择此类药物,合理把握用药的时间和剂量,增强抗感染的效率。同时,深静脉置管置入、年龄≥65岁、使用碳青霉烯类抗菌药物为治疗过程中主要的危险因素,在ICU肾功不全患者治疗中,应该重点考虑,提高治疗效率。     

多烯类抗生素合成基因簇中ABC转运蛋白研究进展

ABC转运蛋白家族是一个广泛存在于不同生物细胞中且功能保守的膜蛋白亚家族;它们是一类单向底物转运泵,通常以主动转运方式完成多种分子的跨膜转运。随着抗生素合成基因簇相关研究的开展,越来越多的簇内ABC转运蛋白被鉴定出来,对其生物学功能的研究正逐渐成为热点。多烯类抗生素作为一类重要的抗真菌药物,能够有效避免真菌产生耐药性,具有非常重要的临床价值。本文以多烯类抗生素合成基因簇为对象,综述了在其中所发现的ABC转运蛋白的研究进展,综合分析了其结构特性与功能间的关系,并对研究应用进行了展望。     

紫茎泽兰花的化学成分

从紫茎泽兰（ Ｅｕｐａｔｏｒｉｕｍ ａｄｅｎｏｐｈｏｒｕｍ ） 的花中分离得到１２ 个化合物, 其中紫茎泽兰内酯为一新的杜松烯类倍半萜内酯化合物, 其它为２ － 乙酰氧基－ ３ , ４ , ６ , １１ － 四去氢杜松烷－ ７ － 酮, ７ － 羰基泽兰酮, 克拉维醇, 丁香酚－ Ｏ－ β－ 吡喃葡萄糖甙, ５ , ４′－ 二羟基－ ３ ,６ － 二甲氧基－ ７ － Ｏ－ β－ 吡喃葡萄糖基黄酮, ５ , ４′－ 二羟基－ ６ ,７ － 二甲氧基－ ３ － Ｏ－ β－ 吡喃葡萄糖基黄酮,３ , ５ , ４′－ 三羟基－ ６ ,７ － 二甲氧基黄酮等化合物。     

萜烯类与苯丙酸类花香挥发物的生物合成与调节

随着花香挥发物提取和检测技术的不断发展以及该技术与分子生物学研究的结合,花香挥发物的生物合成途径和调节机制的研究取得了较大进展,为花香的遗传控制和育种研究奠定了良好的基础。萜烯类和苯丙酸类/苯环型化合物是植物花香挥发物的重要化学成分,它们分别由甲羟戊酸-甲基赤藓醇磷酸途径、莽草酸途径等途径生成,调节机制较为复杂,但以前体物生物合成调节为主。两类花香物质在许多行业得到了应用广泛,但相关研究有待于进一步深入。     

杀念菌素/FR-008生物合成途径中转运基因fscTI与fscTII的功能

摘要:【目的】分析杀念菌素/FR-008 生物合成途径中转运基因fscTI和fscTII的功能。【方法】构建转运基因fscTI和fscTII的敲除质粒pJTU4137,并通过接合转移和同源重组双交换的方法得到转运基因缺失突变株。转运基因fscTI和fscTII也被克隆到高拷贝质粒pJTU1278上用于在链霉菌FR-008(Streptomyces sp．FR-008)的衍生菌株ZYJ-6中进行转运蛋白的过量表达。【结果】获得了转运蛋白缺失的双交换突变株LX10,发酵结果显示该突变株不再产生杀念菌素及其衍生物;过量表达转运蛋白的基因工程菌株LX11,其杀念菌素的产量约是对照菌株的1.5倍。【结论】体内遗传实验进一步证实FR-008生物合成途径中的fscTI和fscTII是ATP依赖的ABC转运基因,fscTI与fscTII的过量表达增加了杀念菌素的产量,为利用此方法提高其它多烯类抗生素的产量提供了例证。     

耐碳氢霉烯类铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶和 基因捕获元件基因检测及同源性分析

摘要：目的　了解大连地区分离的耐碳氢霉烯类铜绿假单胞菌的金属β-内酰胺酶、整合子I和ISCR1的分布情况,并分析其基因多态性特征。方法　收集临床分离的89株耐亚胺培南铜绿假单胞菌,PCR检测金属酶、整合子I、ISCR1耐药基因。脉冲场凝胶电泳（PFGE）进行细菌基因分型。结果　89株亚胺培南耐药的铜绿假单胞菌中,ISCR1基因阳性菌25株（25/89,28%）,其中84%（21/25）为多重耐药,5类及以上药物耐药的菌株占64%（16/25）,金属酶基因阳性为11株（11/89,12%）,其中有8株携带IMP-1基因,3株携带VIM-2,整合子I基因阳性43株（43/89,48%）。但携带金属酶的菌株整合子I、ISCR1基因扩增均为阴性;PFGE分型结果显示：89株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌分为15基因型（A~O）,其中A型46株、B型16株、C型4株、D型5株、E型4株、F型3株、G型2株、H型2株,I型~O型各有1株。基因型集中的A型~G型,各型中的菌株来源于不同医院,呈多态性,每群均存在克隆株。结论　基因捕获元件整合子I基因及ISCR1广泛分布在大连地区耐碳氢霉烯类铜绿假单胞菌中,并与细菌的多重耐药、泛耐药显著相关,特别是ISCR1基因;大连地区整合子I、ISCR1并未携带金属酶基因盒。PFGE结果提示本地区铜绿假单胞菌具有基因多态性,但仍存在高度同源性的流行优势基因型。     

光臀八齿小蠹共生微生物群落组成及其功能基因注释

【目的】揭示光臀八齿小蠹Ips nitidus共生微生物群落组成和功能特征。【方法】对来自中国西北部青海省麦秀自然保护区的光臀八齿小蠹进行肠道和其他组织共生真菌和细菌宏基因组学和相关性网络分析，比较光臀八齿小蠹肠道和其他组织共生真菌及细菌群落组成，分析微生物群落间的相互关系，并采用非冗余蛋白序列比对方法注释共生微生物功能基因。【结果】共发现光臀八齿小蠹肠道和其他组织共生微生物3 520种，真菌和细菌的物种数最高，分别占全部物种数的23.21%和69.01%,平均相对丰度分别为9.69%和13.79%。其他组织中共生真菌白粉菌目(Erysiphales)相对丰度和物种多样性较肠道中的高，而其他组织中酵母目(Saccharomycetales)相对丰度和物种多样性较肠道中的低；其他组织中长喙壳类真菌(ophiostomatoid fungi)多样性(6属16种)较在肠道中的(5属13种)高，在其他组织和肠道中的平均相对丰度分别为0.016%和0.013%。其他组织中肠杆菌目(Enterobacterales)相对丰度和物种多样性高于肠道中的。肠杆菌属Enterobacter、白粉菌属Ery...