猪源乳酸菌产乳酸及其抑菌特性研究

研究了5株(L1、12、L3、L5和L7)分离自仔猪肠道的乳酸菌的产乳酸能力及抑菌特性。结果表明：L5菌株产乳酸的速度最快,培养液中乳酸含量最高,L5菌株培养液pH值的下降速度最快,终末pH值最低,而L1菌株产乳酸的速度最慢,培养液乳酸含量最低。5株乳酸菌对大肠杆菌K88、K99、987P、O141和大肠杆菌E1及金黄色葡萄球菌均有不同程度的抑制作用;排除酸的影响后仍有22％～53％抑菌效果;经热处理后保持有92％以上的抑菌效果;蛋白酶处理后保持85％以上的抑菌效果。     

果寡糖和甘露寡糖对断奶仔猪免疫机能的影响

研究探讨了果寡糖和甘露寡糖对断奶仔猪免疫机能的影响。实验采用随机区组设计法将48头健康、体重一致的35日龄断奶杜洛克仔猪分为4组,每组3次重复,每个重复4头进行为期28天的饲养实验。4个处理组分别为:基础日粮 0.5%果寡糖(FOS组)、基础日粮 0.3%甘露寡糖(MOS组)、基础日粮 0.45%果寡糖 0.25%甘露寡糖(F M组)、基础日粮 75 mg/kg金霉素 40 mg/kg洛克沙生(ABT组)。实验结果表明:(1)寡糖组免疫器官指数较ABT组大(P>0.05)。(2)在断奶后第7天,FOS组(0.32±0.49)、MOS组(0.32±0.04)和F M组(0.32±0.07)均较ABT组(0.20±0.01)显著提高了血清免疫球蛋白A(IgA)的浓度(P<0.05),同时FOS组(3.50±0.49)较ABT组(2.68±0.47)显著提高了IgG浓度(P<0.05);F M组显著提高了断奶后第21天IgG浓度(P<0.05);MOS组显著提高了断奶后第21天IgM浓度(P<0.05)。(3)与ABT组相比,FOS显著提高了断奶后第7天胸腺(21.33±6.03对37.33±4.04)、脾脏(19.67±2.08对30.33±8.73)、淋巴结(24.67±4.16对37.67±2.52)CD4 T淋巴细胞百分数(P<0.05);FOS组(21.33±4.04对32.00±5.29)、MOS组(21.33±4.04对37.33±3.21)、F M组(21.33±4.04对32.00±3.60)显著提高了断奶后第28天胸腺CD4 T淋巴细胞百分数(P<0.05);MOS组(20.67±3.51对29.67±5.51)显著提高了断奶后第7天胸腺CD8 T淋巴细胞百分数;F M组(17.00±1.00对22.67±3.06)显著提高了断奶后第7天脾脏CD8 T淋巴细胞百分数(P<0.05);各寡糖组对断奶后第28天CD4 、CD8 T淋巴细胞百分数影响不显著(P>0.05);ABT组(34.33±5.03)在断奶后第7天较F M组(20.67±6.43)显著提高了淋巴结CD8 T淋巴细胞百分数(P<0.05);在断奶后第7天,FOS组(1.42±0.32)、MOS组(1.52±0.46)、F M组(1.51±0.30)淋巴结CD4 与CD8 比值显著(P<0.05)大于ABT组(0.71±0.03);在断奶后第28天,FOS组(1.36±0.21)和MOS组(1.34±0.16)脾脏CD4 与CD8 比值显著(P=0.01)大于ABT组(0.94±0.29),除此之外,各寡糖组CD4 与CD8 比值较寡糖组大(P>0.05),寡糖组间差异不显著。     

早期断奶仔猪生理生化参数和脏器指数的变化

目的测定早期断奶仔猪血常规和血清生化参数、氨基酸浓度以及脏器指数常值,以供相关研究参考。方法分别采用全血细胞计数分析仪、全自动血液生化分析仪和全自动氨基酸分析仪等。结果断奶后第0、71、4、28天仔猪的血常规和血清生化参数、氨基酸浓度以及脏器指数均取得平均值和标准差。随着日龄的增加,WBC总数和分类计数不断增加,然后趋于稳定;MCV和PDW先降低后升高,第7天时最低;MCH和MCHC不断升高,第14天时最高。TP、LAC和Mg2+的浓度有升高趋势;P、BUN、TCHO和GLU的浓度以及LPS、CK和GPT的活性先降低后升高;AMM的活性和Zn2+、Na+、Cl-的浓度先升高后降低,第7天时最高,然后趋于稳定;TG的浓度在第14天时开始显著下降,然后趋于稳定;ALP的活性先升高后降低,第14天时最高。Asp的浓度不断增加,Cys的浓度不断降低,Ser、Ala、Leu、Phe、Gly、Val、Met、Lys、His、Pro、BCAA、AAA和总氨基酸的浓度先升高后降低,第7天时的浓度最高。肾脏指数不断下降,至第28天时趋于稳定;胃、颌下淋巴结和肝脏指数第7天时最大,脾脏指数第14天时最大。结论随着日龄的增加,早期断奶仔猪多数血常规和血清生化参数、氨基酸浓度及脏器指数表现不同的变化规律。     

猪链球菌2型感染仔猪致脑炎模型的建立

【背景】猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)是危害养猪业重要的病原,给我国养猪业造成了重大的损失,迄今为止仍缺乏猪链球菌2型感染仔猪致脑炎模型,建立合适的模型用于临床药物研发及机制研究为防控该病奠定基础。【目的】构建猪链球菌2型感染仔猪致脑炎模型,通过观察感染仔猪的临床变化、病理学变化、病原分离及PCR鉴定证实模型构建成功。【方法】选取6头健康的三元杂交猪仔猪,随机均分为A、B两组。A组仔猪接种猪链球菌,B组接种生理盐水作为空白对照,观察A组仔猪的临床症状、剖检变化、病理组织学变化。【结果】A组仔猪出现体温升高、精神沉郁、嗜睡以及严重的神经症状,甚至死亡;器官出现严重病变,如脊髓和大脑的神经元细胞的肿胀、坏死、溶解,小脑灰质区浦肯野细胞层和颗粒层见细胞灶状坏死并形成坏死后空腔。【结论】成功构建出猪链球菌2型感染仔猪的脑炎模型。     

仔猪结肠中产甲烷菌群多样性及其与环境因子的相关性

【目的】为评价仔猪结肠中产甲烷菌群多样性及其与环境因子(日粮类型、断奶应激及日龄)的相关性。【方法】分别采集了7、14、21、24和35日龄仔猪结肠内容物,进行基因组总DNA的提取,运用变性梯度凝胶电泳(Denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)技术分析各结肠样总DNA的产甲烷菌的PCR产物,同时研究了与甲烷生成相关的结肠内挥发性脂肪酸(Volatile fatty acid,VFA)的变化情况。【结果】结果表明,仔猪结肠内容物中乙酸、丙酸和总挥发性脂肪酸(Total volatile fatty acid,TVFA)浓度随日龄增加而显著升高(P<0.05),但丁酸浓度未有显著性变化(P>0.05);基于Dice模式的UPGMA聚类分析的DGGE指纹图谱结果显示,7-24日龄结肠样的产甲烷菌群落结构相似性较高,聚集到一个分支上;而35日龄的结肠样聚集到另一分支上;冗余分析(Redundancy analysis,RDA)结果表明,日龄和日粮类型与产甲烷菌群落结构的关联度较高;序列分析表明,仔猪结肠食糜中甲烷菌群主要以甲烷短杆菌为主,同时存在另一类未知甲烷菌。【结论】本研究表明,甲烷短杆菌是仔猪结肠中的优势产甲烷菌,日龄和日粮类型与仔猪结肠中产甲烷菌群落结构的相关性最强。     

仔猪腹泻抗性相关特异表达ESTs的筛选

以久仰香猪、剑白香猪和长白猪3个品种的脾脏为材料,以品种间同一组织不同的发病状态为对照,将DDRT—PCR技术与银染法相结合进行差异显示研究,筛选与仔猪腹泻抗性相关的特异表达ESTs。在脾脏未发病RNA池中检测到5条特异表达ESTs,其中一条与Nck转导蛋白同源,一条与长散布元件反转录酶同源,一条为相似性较高的未知功能序列,两条为新序列。     

两种不同保护剂冻干的仔猪副伤寒活疫苗质量比较

【目的】系统比较两种不同保护剂冻干的仔猪副伤寒活疫苗(耐热苗和常规苗)质量指标,为科学评价两种疫苗质量提供参考。【方法】制备耐热苗和常规苗各3批,分别进行物理性状、纯粹性、活菌计数、安全性、剩余水分、真空度和保存期等参数测定和比较,同时比较冻干前后的活菌存活率及耐老化性能。任选耐热苗与常规苗1批,按3×109 CFU分别口服与肌肉注射仔猪各5头,设相同条件下不免疫对照5头,30 d后静脉注射致死量猪霍乱沙门氏菌,临床观察30 d后评估疫苗的效力。【结果】耐热苗及常规苗的物理性状、纯粹性、活菌计数、安全性、剩余水分、真空度均符合现行《中国兽药典》的要求。3批耐热苗冻干菌存活率分别为88.2%、83.1%和86.4%,耐老化试验后的活菌存活率为83.6%、82.9%和88.8%;然而3批常规苗冻干菌存活率分别为52.3%、56.2%和61.4%,耐老化活菌存活率分别为58.5%、60.2%和54.7%。经37°C、7 d耐老化试验结果显示,耐热苗物理性状良好,而常规苗原有团块表面凹陷1/4-1/2。保存期结果表明耐热苗4°C有效期可达24个月,常规苗仅为9个月。仔猪免疫攻毒结果表明,耐热苗肌肉注射及口服免疫均达100%(5/5)保护;常规苗肌肉注射达80%(4/5)保护,口服达100%(5/5)保护,不免疫对照0保护(5/5死亡)。【结论】耐热苗具有较高的冻干菌存活率和良好的耐老化性能,4°C可长期保存且不影响其免疫效力。     

长白山阔叶红松林土壤水分动态研究

在1990～1992年和2003年对长白山阔叶红松林土壤水分动态进行定位观测研究.结果表明,土壤水分年内变化可划分为5个时期：春季聚水阶段、旱季耗水阶段、雨季蓄墒阶段、秋季失墒阶段和冬春土壤水分相对稳定阶段.利用标准差和变异系数对土壤水分垂直变化进行分层,得出土壤水分剖面分布分为速变层、活跃层和次活跃层,并用相关分析方法分析了各层次间土壤水分及其与其间降水量的关系.     

刺五加提取物对断奶仔猪血常规和抗氧化功能的影响

为研究日粮添加刺五加提取物对断奶仔猪血常规和抗氧化功能的影响,选择21日龄断奶仔猪60头,随机分为3个处理,每个处理20个重复,单栏饲养,分别饲喂基础日粮+0.1%刺五加提取物、基础日粮+0.02%粘杆菌素和基础日粮.于试验开始后第7、14和28 d每个处理随机选取5头试猪,前腔静脉采血,测定血常规和抗氧化指标.结果表明:刺五加提取物能显著改善断奶仔猪的抗病能力,减轻应激反应,机体抗氧化酶活性明显升高;第7 d时提取物组MID、PLT、MDA和NO含量显著小于基础日粮组(P＜0.05);第14 d时提取物组WBC显著小于、CAT活性显著大于基础日粮组(P＜0.05);第28 d时提取物组WBC、MID和GRA显著小于(P＜0.05),SOD活性大于基础日粮组(P＞0.05).     

变性梯度凝胶电泳法研究断奶仔猪粪样细菌区系变化

利用PCR和DGGE技术分析了12头仔猪在断奶后其粪样细菌区系的变化。粪样细菌16S rDNA的V6～V8可变区经PCR扩增,扩增产物经DGGE电泳后再进行相似性分析。结果表明,仔猪断奶当天粪样 DGGE谱带少,同窝仔猪间图谱相似。断奶后,随着断奶时间的推移,每头仔猪的DGGE图谱带逐渐增多,变得复杂和多样,仔猪个体间DGGE图谱差异逐渐增大。仔猪是否同窝以及所采食日粮类型对DGGE图谱没有明显影响。相似性分析还表明,日粮中添加寡果糖的仔猪在断奶后第1周,其粪样微生物区系变化迅速,而后缓慢。