鲫鱼视网膜谷氨酸受体和GABA受体在爪蟾卵母细胞中的表达

我们以两栖类卵母细胞为功能表达系统,通过注射鲫鱼（Ｃａｒａｓｓｉｕｓｃａｒａｓｓｉｕｓ）视网膜ｍＲＮＡ,利用电压箝及药物灌流手段,系统地研究了鲫鱼视网膜内氨基酸受体的类型和特征,结果如下：（１）Ｇｌｕ受体：ＫＡ可以诱发明显的去极化电流,而且Ｄｉａｚｏｘｉｄｅ能增强ＫＡ诱导的反应,这提示鲫鱼视网膜内某些Ｃｌｕ受体是ＡＭＰＡ选择性亚型（ＡＭＰＡ－ｐｒｅｆｅｒｒｉｎｇｓｕｂｔｙｐｅ）。（２）ＣＡＢＡ受体：ＧＡＢＡ能诱发一个快速、光滑的内向电流,绝大部分对ＧＡＢＡ的反应可被ｂｉｃｕｃｕｌｌｉｎｅ所压抑,而ＧＡＢＡ＿Ｂ受体的激动剂ｂａｃｌｏｆｅｎ则无任何作用,这提示,鲫鱼视网膜内大部分是ＧＡＢＡ＿Ａ受体。     

小鼠不同卵龄卵母细胞电刺激后第二极体形成和原核发育的研究

实验以强度为０．４５ＫＶｃｍ,持续不同时间（８０、１６０、３２０、６４０μｓ）的电脉冲刺激不同卵龄（注ｈＣＧ后１３、１５、１７、１９小时）小鼠卵母细胞,观察电刺激后第二极体形成和原核发育情况。实验结果说明：（１）卵母细胞守全活化（形成原核）率随卵母细胞也出现ＭⅢ现象,未活化卵母细胞形成第二极体（ＭⅢ）者随卵龄增加而明显增多;（３）电刺激活化小鼠卵母细胞在培养６－９小时之间仍有６．７％形成原核。     

鸡视网膜甘氨酸受体,乙酰胆碱受体及离子通道在两栖类卵母细胞中的表达和

利用两栖类卵母细胞表达鸡视网膜ｍＲＮＡ,借助电压箝方法研究鸡视网膜中的神经递质受体和离子通道。结果表明,鸡视网中存在甘氨酸受体和Ｎ型的乙酰胆碱受体。但天冬氨酸和５－ＨＴ、多巴胺未能诱导电流反应,此外还检测到电压依赖性的离子流、主要为延迟整流的外向钾电流和快速的内向钠电流。     

小鼠卵激活过程中胞质游离Ca~(2 )的变化及孤雌发育研究

乙醇和电刺激均可使小鼠MⅡ期卵母细胞激活并在体外孤雌发育至囊胚。小鼠卵对乙醇十分敏感。用7%—8%乙醇处理5min后95%以上的卵母细胞(卵龄为HCG注射后18—19h)内形成原核。3—4次电刺激后卵的激活率为71.58%;仅刺激1次卵的激活率为63.63%。乙醇刺激可诱导卵内游离Ca~(2 )浓度出现多次升高;单一电刺激仅能诱导卵内游离Ca~(2 )浓度出现1次升高;多次电刺激可诱导卵内游离Ca~(2 )浓度多次升高,而且电刺激次数与Ca~(2 )浓度升高成一一对应关系。对于电刺激,介质中足够量的Ca~(2 )对卵激活至关重要。在无Ca~(2 )的介质中,电刺激很难使卵激活。正常受精刺激诱导卵内游离Ca~(2 )浓度出现多次有规律的升高。实验结果表明,卵母细胞激活过程中胞质游离Ca~(2 )浓度重复多次升高可促使卵母细胞恢复成熟分裂。     

哺乳动物促性腺激素对文昌鱼卵母细胞成熟的影响

在繁殖季节,将哺乳动物促性腺激素注射到性腺正在成熟文昌鱼体内,注射３６小时后,检查促性腺激素的生理效应,结果表明这两种激素均有效地诱发卵母细胞成熟和产卵。从而认为雌性文昌鱼的生殖活动,像脊椎动物一样,可能受促性腺激素的调控。     

人类卵母细胞减数分裂的生理和病理机制

正常的卵子发生是人类成功繁育后代的关键步骤。女性胚胎发育时期,原始生殖细胞从有丝分裂转变为减数分裂,经过同源染色体配对和重组后,减数分裂被阻滞在减数第一次分裂前期的双线期。卵泡内卵母细胞的减数分裂阻滞的维持主要归因于胞质中高浓度的环磷酸腺苷。在月经周期中,卵泡刺激素和黄体生成素促进某些卵母细胞恢复减数分裂,完成排卵过程。卵母细胞减数分裂过程中发生任何缺陷都可能影响卵子发生,进而影响受精和胚胎发育过程。辅助生殖、高通量测序和分子生物学技术的快速发展,为人类认识减数分裂背后的精确分子机制以及卵母细胞成熟缺陷疾病的发病机制与诊疗提供新的思路和手段。本文主要介绍了近年来发现的调控卵子发生的生理和病理机制,涉及同源重组、减数分裂阻滞与恢复、母源mRNA降解、翻译后调节、透明带组装等过程,旨在增进相关领域研究人员对卵母细胞减数分裂的了解,并为进一步机制研究和疾病治疗提供理论基础。     

环境温度影响蟾蜍卵母细胞成熟能力的机制之实验分析

长年饲养在高温(28—30℃)环境中雌性中华大蟾蜍,它们的卵母细胞可以长足,但经激素处理时,生发泡不破裂,仅显示成熟过程早期阶段的变化。值得注意的是,在孕酮刺激后的高温卵卵质中,出观了一种能诱发低温卵恢复减数分裂的物质,称作为“依赖冬眠因子的促成熟物质”(HF-MPS)。HF-MPS 与MPF 有不少相似之处,如孕酮处理后,它们在卵质中出现的时间相仿,它们的形成均不依赖于转录水平,而是依赖于翻译水平的蛋白质合成活动;但亦存在不同之处,如MPF 诱发低温卵GVBD 时程不受温度影响,而HF-MPS 在10℃环境中,诱发低温卵GVBD 的时间明显延缓;MPF 不仅能诱发低温卵GVBD,而且同样能诱发高温卵GVBD,然而,HF-MPS 只能诱发低温卵GVBD。由此表明,MPF 和HF-MPS 似乎是截然不同的两类活性蛋白质。高温卵缺少低温诱发产生的“冬眠因子”,所以不能恢复cdc 2基因的转录活动,不能实现MPF 自身催化扩增作用,不能保证孕酮处理后的卵母细胞完成正常成熟的全过程变化。足见,低温是中华大蟾蜍卵母细胞恢复减数分裂过程中的必要条件,是导致中华大蟾蜍现有区域分布的内在原因之一。