浙江蝮蛇毒中三种磷脂酶A_2的比较

从浙江蝮蛇毒中纯化了三种磷脂酶A_2。前文已报道了其中二种——中性磷脂酶A_2,即蝮蛇毒素(Agkistrodotoxin)和碱性磷脂酶A_2——的纯化及性质的研究。本文报道的是第三种,即酸性磷脂酶A_2的纯化方法,比较了这三种磷脂酶A_2的特性,包括分子量、氨基酸组成、N末端、等电点、热稳定性、酶活性、毒性和溶血活性等。结果表明,它们有相似的分子量和热稳定性,但在其他方面却有显著的差别。在酶活性方面,酸性酶活性最高,碱性酶活性最低;对小白鼠的致死毒性,中性酶最高,碱性酶较低,而酸性酶几乎不表现毒性;对大白鼠红细胞的溶血现象,碱性酶最强,中性酶次之,酸性酶几乎不溶血。因此推测磷脂酶A_2的溶血效应与磷脂酶A_2分子的电荷有关。     

聚酰胺薄膜层析及其用于蛋白质化学分析

聚酰胺薄膜层析是1966年后发展起来的一种新层析技术。特别在用于分析氨基酸衍生物——DNS-氨基酸、DNP-氨基酸和PTH-氨基酸时,具有灵敏度高、分辨力强、速度快、操作方便等优点,超过了过去分析这类化合物使用的纸层析、纸电泳、硅胶薄板层析等方法。在蛋白质化学结构分析中,聚酰胺薄膜层析结     

蝮蛇突触前神经毒素的纯化及其生化性质的进一步研究

本文在前文的基础上,改进了蝮蛇神经毒素的分离方法,纯化了蝮蛇毒中的两个神经毒素之一,突触前神经毒素Agkistrodotoxin(简写为ATX),并对其生化特性进行了分析。应用DEAE-纤维素柱层析、CM-葡聚糖凝胶柱层析和聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳等方法分离纯化,得到一个均一的神经毒素蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶在pH 碱性和pH 酸性电泳鉴定,都呈现一条区带。氨基酸定量分析结果表明,此神经毒素由121个氨基酸组成,由此计算出的分子量为13,700,与用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得值接近。N 末端是门冬酰胺,C 末端是丝氨酸。纯化后的神经毒素显示磷脂酶A 活性,比活相当于粗毒的11倍。     

蝮蛇突触前神经毒素的纯化及其生化性质的进一步研究

本文在前文的基础上,改进了蝮蛇神经毒素的分离方法,纯化了蝮蛇毒中的两个神经毒素之一,突触前神经毒素Agkistrodotoxin(简写为ATX),并对其生化特性进行了分析。应用DEAE-纤维素柱层析、CM-葡聚糖凝胶柱层析和聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳等方法分离纯化,得到一个均一的神经毒素蛋白,经聚丙烯酰胺凝胶在pH碱性和pH酸性电泳鉴定,都呈现一条区带。氨基酸定量分析结果表明,此神经毒素由121个氨基酸组成,由此计算出的分子量为13,700,与用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得值接近。N末端是门冬酰胺,C末端是丝氨酸。纯化后的神经毒素显示磷脂酶A活性,比活相当于粗毒的11倍。     

浙江蝮蛇毒磷脂酶A抗凝作用的研究

本文研究分析了从浙江产蝮蛇毒提纯的三种磷脂酶A(PLA)的抗凝活性,结果只有碱性PLA具有抗凝作用,而酸性PLA与中性PLA(Agkistrodotoxin)均无此作用。碱性PLA能显著延长血浆复钙时间和凝血酶原时间,影响血液凝血活酶的生成,抑制血小板磷脂与红细胞磷脂的促凝活性,但对凝血酶时间及纤维蛋白平板溶解试验无影响。这些结果表明,碱性PLA可能通过对膜磷脂的作用而干扰凝血酶原酶的形成。碱性PLA明显改变了血小板和红细胞的电泳速率,而酸性及中性PLA则影响较小,提示碱性PLA抗凝活性可能与膜磷脂特异活性部位的结合反应有关。     

人血清中游离氨基酸的萤光微量测定法

本文介绍用邻苯二甲醛与氨基酸产生萤光微量测定人血清中游离氨基酸含量的方法。灵敏度可测到1至0.1×10~(-9)克分子氨基酸。每次测定的血清用量为5至10微升。本法具有简单、快速、灵敏的优点。血清中其他含氨物质如脲、尿酸、肌酐和氨对测定无干扰。我国正常人血清的游离氨基酸含量,从52个人测得的平均值为2.83±0.45(S.D)毫克分子/升。此法适用于临床检验和科研。     

人血清中游离色氨酸、苯丙氨酸和酪氨酸的微量测定——附我国健康成人测定值报告

测定人血清中游离氨基酸、特别是某些特殊氨基酸含量的变化,作为研究蛋白质代谢的指标,在临床医学研究方面已有很多报道。目前从测定生物体液和组织中,个别或某些氨基酸浓度的变化,已能诊断六十余种先天性氨基酸代谢缺陷的疾病,从而指导治疗。如患苯酮尿症的婴儿,血清中游离苯丙氨酸浓度可高出常人数倍,游离酪氨酸浓度则减低,如能在出生后短期内作出诊断并限制食物中苯丙氨酸含量,     

人血清中游离氨基酸的萤光微量测定法

本文介绍用邻苯二甲醛与氨基酸产生萤光微量测定人血清中游离氨基酸含量的方法。灵敏度可测到1至0.1×10~(-9)克分子氨基酸。每次测定的血清用量为5至10微升。本法具有简单、快速、灵敏的优点。血清中其他含氮物质如脲、尿酸、肌酐和氨对测定无干扰。我国正常人血清的游离氨基酸含量,从52个人测得的平均值为2.83±0.45(S.D)毫克分子/升。此法适用于临床检验和科研。     

两种单羧甲基组氨酸异构体的结构

核糖核酸酶在pH5.5时能被溴代乙酸或碘代乙酸抑制,并从失活的酶的水解物中分离出单羧甲基组氨酸,因而便提供了粗氨酸残基参与了该酶的活性中心的一个直接证据。Gundlach等并且报导,从失活的酶的全水解物中所分离出的单羧甲基组氨酸只符合于从N~α-乙酰组氨酸经羧甲基化再经