饲用型青霉α-半乳糖苷酶活力测定的研究

研究了比色法测定饲用α-半乳糖苷酶活力,以对硝基苯酚-α-D-吡喃半乳糖苷为底物和对硝基苯酚作标准产物。酶活力的测定条件受很多因素的影响,如酶浸提液的pH、酶液稀释倍数、反应温度、作用时间。其中稀释倍数和pH的影响较为显著。稀释酶液的酶活测定值在0．02～0．07U／mL内较为合适。考虑到动物饲用酶制剂的特殊性,测定α-半乳糖苷酶活力时建议规定pH为5．5,反应温度为40℃。根据研究结果,反应时间采用10min,比色波长405nm为宜。     

角蛋白酶水解豆粕的微生物多样性分析

【背景】酶解饲料底物在酶解至干燥过程中微生物的变化影响着酶解饲料的营养成分以及风味的改变,从而影响动物对其进行采食、消化和吸收,最终影响动物肠道健康。【目的】探究两种酶解物料(纯豆粕和豆粕麦麸混合物)在酶解至干燥过程中的微生物多样性变化。【方法】实验室条件下,采用平板计数法测定物料总细菌数、总霉菌和酵母菌数变化。中试条件下,采用16S rRNA基因和ITS rDNA的高通量测序,检测物料中细菌和真菌多样性随酶解时间(0-36 h)的变化。【结果】酶解前后的平板计数结果显示,加入角蛋白酶处理24h后,两种物料中的细菌数量相对于原料提升了1 000-10 000倍。而经过风干过后,细菌和真菌的数量较风干前下降90%-99%。通过MiSeq平台的16S rRNA基因和ITS rDNA测序结果表明,两种酶解豆粕均具有相似的α多样性指标,微生物丰富度水平相近。然而,16S rRNA基因测定的β多样性结果显示,Fructobacillus属和魏斯属(Weissell)在36h的酶解进程中成为优势菌属;纯豆粕酶解物中的Fructobacillus属在数量上更占优势,豆粕麦麸混合酶解物中则魏斯属更具数量上的优势。ITS rDNA测定的β多样性结果显示,纯豆粕酶解物中曲霉属(Aspergillus)一直占据着数量上的绝对优势,而豆粕麦麸混合酶解物中链格孢属(Alternaria)、赤霉属(Gibberella)和曲霉属(Aspergillus)则在前18 h相对含量较高,但随着时间的延长相对数量减少;毕赤酵母属(Pichia)和酵母属(Remersonia)逐渐占据数量上的优势。【结论】小麦麸作为酶解豆粕辅料能够改变酶解豆粕中的微生物多样性,并使其中的微生物生长更偏向于魏斯属细菌和酵母类真菌。     

硫色曲霉木聚糖酶基因xynA的克隆、表达及酶学性质分析

目的:分析硫色曲霉产木聚糖酶的酶学性质。方法:利用RT-PCR克隆了硫色曲霉的木聚糖酶基因xynA,构建了该基因的原核表达载体,并获得了诱导表达。结果:纯化的木聚糖酶的最适催化温度为50℃,最适反应pH值为2.4,在30～50℃保温30min对酶活性没有大的影响。结论:木聚糖酶在低pH值下的催化活性使之在饲料工业中具有较好的应用前景。