黑木耳核糖体失活蛋白cDNA 3′-端的克隆与分析

为了克隆黑木耳核糖体失活蛋白cDNA 3′-端,根据随机测得的中间一段蛋白质序列设计简并引物,应用RT-PCR和3′-RACE反应方法,将得到的基因片段与质粒连接,并转化至大肠杆菌中,进行蓝白筛选,再通过琼脂糖凝胶电泳法和PCR法验证白斑,从而得到阳性重组质粒,最后克隆出该目的蛋白基因片段。结果表明,克隆出的cDNA 3′-端为330bp的开放阅读框(ORF),编码107个氨基酸和2个终止密码子。经试验证明和文献检索,克隆得到的cDNA 3′-端为一种新基因。     

黑木耳菌丝体核糖体失活蛋白的研究

目的：由悬浮培养的黑木耳菌丝体中分离纯化黑木耳的核糖体失活蛋白,对其生化性质及生物学活性进行研究。方法：实验中采用了DEAE-离子交换纤维素,Affi-Gel Blue Gel亲和与Bio-Gel 100柱层析方法。结果：从100g悬浮培养黑木耳菌丝体中得到4.14mg的核糖体失活蛋白,命名为Auriculin。同时证明它在家兔网织红细胞裂解系统中具有抑制蛋白质的翻译活性。结论：经试验证明和文献检索,Auriculin为黑木耳菌分离纯化获得的核糖体失活蛋白,一种新蛋白质。     

黑木耳核糖体失活蛋白的质谱分析

目的：对悬浮培养黑木耳菌丝体中分离纯化得到的核糖体失活蛋白进行质谱分析,测定其肽的指纹图谱。为用5′-RACE与3′-RACE方法,克隆和表达核糖体失活蛋白的基因,设计5′和3′末端的PCR引物。方法：使用HPLC和MALDI-TOF-MS（基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱）分析方法。结果：测定出肽的指纹图谱及三个随机肽段的氨基酸序列。结论：可根据所测肽段氨基酸序列设计5’-和3’-RACE的引物。     

东北羊角芹的组织培养与快速繁殖

1植物名称 东北羊角芹（Aegopodium alpestreLedeb．）。 2材料类别 植株的茎段。 3培养条件 以MS为基本培养基。芽诱导培养基：（1）MS＋6-BA0．5mg·L-1（单位下同）＋IBA0．2;（2）MS＋6-BA1．0＋IBA0．2。