一种适于植物幼胚mRNA整体原位杂交的方法

A mRNA whole-mount in situ hybridization method is reported here for quick, direct analysis of the spatial and temporal mRNA expression patterns in plant young embryos. A cDNA clone THE3 (tobacco heart embryo 3) was isolated by differential screening from tobacco (Nicotiana tabacum L.) heart embryo cDNA library as compared with the globular embryo cDNA library. The distribution of THE3 mRNA in tobacco heart embryos and globular embryos was investigated by a whole-mount in situ hybridization technique, showing that THE 3 is preferentially expressed in heart embryos.     

烟草初生胚乳细胞在微室培养中的发育(英文)

用酶解_研磨法分离出烟草 (NicotianatabacumL .)受精后胚囊和初生胚乳细胞进行微室饲养培养。培养基为Km8p附加各种其他成分 ,饲养细胞为分裂旺盛的烟草叶肉原生质体 ,在 2 5℃下静止暗培养。培养 3d后 ,初生胚乳细胞开始第一次分裂 ,继续分裂至 14d时形成大的细胞团。首次报道了双子叶植物初生胚乳细胞的离体发育。     

烟草初生胚乳细胞在微室培养中的发育

烟草初生胚乳细胞在微室培养中的发育 李师弢 房克凤 杨弘远*     

链霉菌胞外多糖139A生物合成中引导糖基转移酶基因的克隆和鉴定

链霉菌139能够产生一种新的胞外多糖139A,该多糖具有抗类风湿性关节炎的活性。为研究多糖139A的生物合成基因簇,首要策略是克隆到在多糖139A的生物合成中起关键作用的引导糖基转移酶基因。根据其他几个种属的糖基转移酶氨基酸序列的两个保守区域设计简并引物,通过PCR方法扩增出相应的DNA片段作为探针,从链霉菌139基因组文库中分离到引导糖基转移酶基因ste5,并定位于约32kb的基因簇上。序列分析发现其蛋白序列与引导糖基转移酶具有较高的同源性,其C-端含有A,B和C3个保守区,N-端具有5个跨膜区。引导糖基转移酶基因阻断突变株不能够产生多糖139A表明其参与多糖139A的生物合成。     

烟草合子与二胞原胚在离体培养中的发育

用酶解-研磨法分离烟草与大叶烟草受精后的胚囊,继之以显微解剖分离合子与二胞原胚。将3—5个合子或二胞原胚置于微室的琼脂糖小滴中,以预先培养3—4天、分裂1—2次的烟草、大叶烟草或黄花烟草叶肉原生质体饲养。培养基为KM8p与其它附加成分。在25℃与黑暗下静置培养。培养3—4天,约60%合子完成第一次分裂。多数行不等分裂产生大小两个细胞。12天后形成少数原胚或多细胞团。二胞原胚培养亦分裂为多细胞原胚。研究了合子分离方法、合子发育时期、饲养细胞种类与培养天数等因素对合子离体发育的影响。