一种改进后的重叠延伸PCR法对被孢霉重组载体的构建

为了提高DNA大片段的拼接效率,通过引入逐次退火的PCR的方法,改良了传统的重叠延伸PCR方法。逐次退火PCR法,一方面延长了重叠区的PCR引物长度;另一方面把原来在1个循环中1个退火温度改成若干个,逐次降低退火温度,适用于Tm值相差比较大的引物;相邻的退火温度之间相差3-6℃。结果显示,通过此种方法成功拼接了ω3(2)和HCT两个大片段;PCR产物电泳条带单一,克隆测序证实序列完全正确,可以直接应用于后续试验。这种改进后的方法可以有效减少非特异性扩增,提高灵敏度,把这种方法称之为逐次退火重叠延伸PCR。     

山东省生物多样性县域分布

生物多样性保护是继气候变化之后又一全球环境热点, 并已上升为国家战略。摸清生物多样性区域分布状况是生物多样性保护的一项基础工作。以县级行政区域为单元, 全面、系统地调查了山东省生态系统类型、野生高等动物、野生维管束植物、植被垂直层谱、特有物种、受威胁物种、外来入侵物种的种类及其县域分布状况, 并发现了王锦蛇(Elaphecarinata)、乌梢蛇(Zaocys dhumnades)、北滑蜥(Scincella septentrionalis)等山东省新记录种, 建立了山东省各县域的物种名录和生物多样性数据库, 讨论了生物多样性县域分布格局。