聚合酶链反应鉴定马肉方法的建立及应用

依据马卫星DNA序列设计了1对引物,建立了PCR鉴定生、熟马肉的方法。引物Ⅰ 5′-GTTGTGCCTTTCAGCTCTAGG-3′,合成浓度2.64μg/μl;引物Ⅱ 5′-ACAGCATCTTG-CATCCAGC-3′,合成浓度2.97μg/μl,设计扩增长度为186bp。PCR扩增体系为50μl,循环参数为94℃ 40s、49.5℃ 50s、72℃ 60s,35个循环后72℃保温延伸7min,产物经3％琼脂糖凝胶电泳鉴定。应用本方法可以从生鲜马肉、煮熟马肉、高压马肉的全基因组DNA中扩增出186 bp的目的DNA条带,而对牛、羊、猪、驼、鹿等15种动物的DNA扩增则呈阴性反应。其     

人α-卫星DNA特异性片段的体外扩增

本研究依据α-卫星DNA序列,经计算机辅助PCR引物分析和设计软件处理,10对引物,从中优选出5对,进行引物内聚体、二聚体分析,选出最优引物1对,用DNA合成仪合成:引物Ⅰ:5′-ATTAGCCAACTGTTTCC-CTGC-3′,合成浓度2.145/μg/μl;引物Ⅱ:5′-GTCTTGCTTCTTTCAAAGCGC-3′,合成浓度3.135μg/μl;设计扩增长度157 bp。PCR反