一种食用菌提取物y3对烟草花叶病毒的钝化作用及其机制

测定了从食用菌毛头鬼伞(Coprinus comatus)中提纯的y3蛋白对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的钝化作用,结果表明y3对TMV有较强的体外钝化作用,在心叶烟枯斑寄主上对TMV的抑制中浓度约为2.0μg/mL;y3在pH9.0时较稳定;TMV与y3混合后用RNase处理,测得侵染率为61.74%,比未用RNase处理的对照降低了38.26%,说明y3具有一定的体外脱衣壳作用;另外电镜观察发现y3可使部分TMV粒体发生裂解,变短.     

毛头鬼伞(Coprinus comatus)中一种抗病毒蛋白y3特性和氨基酸序列分析

食用菌中含有多种抗病毒蛋白,可用于植物保护．利用离子交换层析技术和凝胶层析技术,从食用菌毛头鬼伞中提取到抗植物病毒蛋白y3．实验结果表明,y3是一种糖蛋白,利用Western杂交方法可以在发酵菌丝体和子实体中同时检测到,说明可能是组成型表达．根据其N端氨基酸序列,使用RACE-PCR克隆技术,获得了蛋白的氨基酸序列和部分cDNA序列．浓度为2.0 μg/ml时,蛋白y3对烟草花叶病毒(TMV, 20 μg/ml)侵染心叶烟的抑制率为50％,实验同时表明,y3还可抑制病毒在寄主普通烟Nicotiana tabacum var. K326中的复制．     

毛头鬼伞(Coprinus comatus)中一种碱性蛋白的纯化及其活性

用离子交换层析(CM-sepharose FF)和凝胶层析(Superdex^TM 75)方法,从新鲜食用菌毛头鬼伞(Coprinus omatus)子实体中分离纯化出一碱性蛋白y3,经SDS-PAGE初步确定其分子量约为14．4kD。活性检测结果显示：当其浓度为12．5μg／mL时,对烟草花叶病毒(TMV)在心叶烟枯斑寄主上的侵染抑制率达83．0%;y3对兔血凝集活性滴度为2^5,对人血凝集活性滴度为26,其浓度分别为1．562μg／mL和0．78lμg／mL;利用胃癌细胞株MGC-803检测y3体外抗肿瘤活性,其IC50为12μg／mL。y3 N-端序列为NRDVAACARFIDDFCDTLTP,为一新的蛋白序列。在SWISS-PORT上登录号为P83477。     

毛头鬼伞（Coprinus comatus）中一种碱性蛋白的纯化及其活性

用离子交换层析（CMsepharose FF）和凝胶层析（SuperdexTM75）方法,从新鲜食用菌毛头鬼伞（Coprinus comatus）子实体中分离纯化出一碱性蛋白y3,经SDSPAGE初步确定其分子量约为14.4kD。活性检测结果显示：当其浓度为12.5μg/mL时,对烟草花叶病毒（TMV）在心叶烟枯斑寄主上的侵染抑制率达83.0%;y3对兔血凝集活性滴度为2.5,对人血凝集活性滴度为26,其浓度分别为1.562μg/mL和0.781μg/mL;利用胃癌细胞株MGC803检测y3体外抗肿瘤活性,其IC50为12μg/mL。y3 N端序列为NRDVAACARFIDDFCDTLTP,为一新的蛋白序列。在SWISSPORT上登录号为P83477。     

霍山石斛DhGMDS基因克隆及低温胁迫下表达

基于霍山石斛转录组数据库,利用染色体步移技术,克隆霍山石斛GDP-甘露糖4,6-脱水酶基因(DhGMDS)及其启动子,采用实时荧光定量PCR方法检测该基因的组织表达模式及低温处理下的表达,为进一步解析霍山石斛抗寒机制和遗传改良提供理论依据。结果表明：(1)成功克隆获得DhGMDS基因(GenBank登录号MW855573),其cDNA序列为1 134 bp, gDNA序列为1 523 bp,无内含子。(2)序列一致性分析显示,DhGMDS蛋白与黄花石斛(Dendrobium catenatum)的GMDS蛋白序列相似性达到99.03%;系统进化树分析表明,霍山石斛DhGMDS基因与黄花石斛GMDS基因处于同一进化节点上,二者亲缘关系近。(3)启动子序列分析发现,在DhGMDS基因上游启动子区含有光、低温、干旱和ABA响应元件,且具有MYB等转录因子识别和结合位点。(4)实时荧光定量PCR分析显示,DhGMDS基因在霍山石斛的花中表达量最高,其次为茎、叶,根中表达量最低;经4℃低温处理72 h后,DhGMDS基因受低温胁迫诱导上调表达,且在低温处理24 h的相对表达量最高,表明DhGMD...     

YP3：食用菌榆黄蘑中新的植物病毒抑制物蛋白

食用菌中含有多种抗病毒蛋白,可用于植物保护.采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-纤维素离子交换层析和SephacrylTMS-200凝胶层析方法,从食用菌榆黄蘑新鲜子实体中提取到一单亚基蛋白,命名为YP3.利用SDS-聚丙烯酰胺不连续凝胶电泳初步估计其分子量大约为27.6 kDa.氨基酸组成分析表明该蛋白非常类似其它的抗植物病毒蛋白,并且几乎不含糖.其N-末端序列为NRDVAACARFIDDFCDTLTP,在GenBank中没有找到同源序列.浓度为0.24 mg/L时蛋白YF3对烟草花叶病毒(TMV 20 mg/L)侵染心叶烟的抑制率为50%.同时还发现YP3对供试的细菌和真菌没有抑制活性,对胃癌细胞株MGC-803、肝癌细胞株SMMC-7721、肺癌细胞株SPC-A1的细胞增殖具有一定的抑制作用,其IC50大约为20 mg/L.     

毛头鬼伞(Coprinus comatus)中一种抗病毒蛋白y3特性和氨基酸序列分析

食用茵中含有多种抗病毒蛋白,可用于植物保护,利用离子交换层析技术和凝胶层析技术,从食用茵毛头鬼伞中提取到抗植物病毒蛋白y3,实验结果表明,y3是一种糖蛋白,利用Western杂交方法可以在发酵茵丝体和子实体中同时检测到,说明可能是组成型表达,根据其N端氨基酸序列,使用RACE-PCR克隆技术,获得了蛋白的氨基酸序列和部分cDNA序列,浓度为2.0 μg/ml时,蛋白y3对烟草花叶病毒(TMV,20 μg/m1)侵染心叶烟的抑制率为50%,实验同时表明,y3还可抑制病毒在寄主普通烟Nicotirma tabacum Var.k326中的复制.     

一种食用菌提取物y3对烟草花叶病毒的钝化作用及其机制

测定了从食用菌毛头鬼伞(Coprinus comatus)中提纯的y3蛋白对烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)的钝化作用,结果表明y3对TMV有较强的体外钝化作用,在心叶烟枯斑寄主上对TMV的抑制中浓度约为2．0μg／mL;y3在pH9．0时较稳定;TMV与y3混合后刚RNase处理,测得侵染率为61．74％,比未用RNase处理的对照降低了38．26％,说明y3具有一定的体外脱衣壳作用;另外电镜观察发现y3可使部分TMV粒体发生裂解,变短。     

丹参SmVS基因的克隆和表达分析

为了解丹参(Salvia miltiorrhiza)的Vinorine合成酶基因(VS)的功能,从丹参中克隆了SmVS基因,并通过Ex PASy等在线分析软件对其进行生物信息学分析,同时利用RT-qPCR技术分析其表达模式。结果表明,SmVS基因全长726 bp,编码241个氨基酸,编码蛋白分子量为26 861.72,等电点PI为5.66,为膜外蛋白,推测定位于线粒体。系统进化分析表明,丹参SmVS与野生油橄榄(Olea europaea var. sylvestris)的VS亲缘关系较近。SmVS基因在丹参根中的表达比叶的高,叶中的转录水平在21:00最高。因此,推测SmVS基因与光应答有关。     

核桃种植主要病虫害防治方法和措施

在核桃的种植过程中,病虫害是影响其正常生长的主要因素之一。为有效提高核桃种植的产量和品质,本文在分析核桃种植过程中存在问题的基础上,探讨了核桃病虫害产生的原因,并针对几种常见的核桃病虫害提出相应的防治方法和措施,为今后核桃种植病虫害防治方法的改进提供依据。