凤眼莲无菌苗培养及其克藻效应

次第选用固体培养基、有机培养溶液和无机培养溶液,通过改善培养条件,从凤眼莲的腋芽培养出生长正常的无菌苗。用生物检测法测试无菌苗对衣藻的克制效应。试验结果表明,在无根际微生物着生的条件下,凤眼莲种植水仍然显示了克藻作用,说明克藻物质是由凤眼莲本身分泌的,不是由根际微生物所产生的。     

鼠疫耶尔森氏菌rV270抗原的克隆、表达及其免疫保护作用评价

目的：为研制鼠疫亚单位疫苗,克隆、表达并纯化去除产生免疫抑制作用序列后的鼠疫耶尔森氏菌LcrV抗原（rV270）。方法：依据已知的LcrV的核苷酸序列,避开其产生免疫抑制作用的区段设计引物,扩增rV270基因并克隆到pET24a载体中,在大肠杆菌BL21中表达His-rV270融合蛋白：表达产物先后经Co^2＋亲和层析和Sephacryl S-200HR凝胶柱纯化,并在纯化过程中应用凝血酶切除His标塔;氢氧化铝佐剂吸附重组抗原后免疫BALB／c小鼠,初次免疫后第21天加强免疫1次,第5周使用104CFU鼠疫菌141强毒株攻毒,测定其免疫保护作用。结果：rV270以可溶性方式表达;应用Co^2＋亲和层析柱和Sephacryl S-200HR凝胶柱结合凝血蛋白酶切除His标签的方法可得到不含标签的较高纯度的重组蛋白;攻毒实验中实验组小鼠全部存活,而对照组全部死亡。结论：获得了具有良好免疫保护作用的rV270蛋白,可用于鼠疫亚单位疫苗的研究。     

凤眼莲根系中抑藻物质分离与鉴定

植物之间相生相克现象指的是植物通过向环境分泌化学物质对另一植物产生影响(Rice 1984)。对这种现象的研究不单在植物生态、生理的基本理论上有重大意义,而且在作物增产、森林抚育、植物保护、污染防治及医疗卫生等实践中有着广阔的应用前景。1986～1987年,我们利用凤眼莲来治理富营养化水域获得了满意的效果(孙文浩等1989),原来藻类繁生的水域种植了凤眼莲后,藻类显著减少甚至消失,水变     

基于EPG的三种刺吸式害虫在苹果苗上的取食行为比较

【目的】苹果绵蚜Eriosoma lanigerum、绣线菊蚜Aphis citricola和梨网蝽Stephanitis nashi是苹果园的一类重要害虫,它们以刺吸式口器对苹果树造成不同程度的危害。本研究旨在明确这3种刺吸式昆虫在苹果树上取食行为差异。【方法】利用刺吸电位(electrical penetration graph, EPG)技术对苹果绵蚜和绣线菊蚜成虫在苹果苗韧皮部和非韧皮部上的EPG指标,以及苹果绵蚜、绣线菊蚜和梨网蝽成虫苹果苗上的取食行为进行了比较分析,分析了这3种害虫的成虫在苹果苗上取食8 h各种波形平均持续时间的占比。【结果】结果表明,苹果绵蚜和绣线菊蚜成蚜在苹果苗上均产生6种取食波形,即非刺探波(np)、路径波(C)、意外穿刺细胞非主动取食细胞波(pd)、木质部取食波(G)、韧皮部唾液分泌波(E1)和韧皮部取食波(E2);而梨网蝽成虫取食过程中只产生非刺探波(np)、表皮刺穿波(A)、叶肉细胞取食波(Gc)和木质部取食波(E)4种波形。从蚜虫在苹果苗非韧皮部上取食的EPG指标看,苹果绵蚜成蚜pd波平均时间显著高于绣线菊蚜的,而刺探次数、np波总时间和pd波次数均显著低于绣线菊蚜的。从蚜虫在苹果苗韧皮部上取食的EPG指标来看,除第1次出现E2波的时间外,各指标没有显著差异。从3种害虫在苹果苗上取食8 h各波形的占比来看,梨网蝽成虫的np波总时间所占比例最高(53%),其次是绣线菊蚜成虫的(24%),苹果绵蚜成虫的最低(为1%)。同时,苹果绵蚜和绣线菊蚜成虫取食波为E2波,所占总时间比例分别为35%和25%,而梨网蝽的取食波为Gc波(占总时间比例为36%)和E波(占总时间比例为11%)。【结论】本研究阐释了苹果园刺吸式口器害虫的生态位分离和取食行为学机制,为果园刺吸式口器害虫的综合治理提供了理论依据。     

抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体的制备及双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测法的建立

目的：制备针对嗜肺军团茵血清8型的单克隆抗体,并建立双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法。方法：用甲醛灭活的嗜肺军团菌血清8型菌免疫BALB／c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,建立双抗夹心ELISA检测方法。结果：研制出8株能特异性分泌抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,Ig类型分别为IgM（2株）、IgG,（1株）和IgG,（5株）;利用IgG1型单抗6G10与6C7配对,建立了双抗夹心ELISA检测方法,该方法的最低检出浓度为2．6×10^5cfu／mL,除与金黄色葡萄球菌有微弱的交叉反应外,与14株其他血清型嗜肺军团菌、17株非嗜肺军团菌及11株非军团菌均无交叉反应,具有较高的特异性。结论：制备了具有高特异性和亲和力的抗嗜肺军团菌血清8型单克隆抗体,并建立了双抗夹心EUSA检测方法。     

自然生境中亚硝酸盐型厌氧甲烷氧化细菌研究进展

随着功能微生物介导的亚硝酸盐型厌氧甲烷氧化(nitrite-dependent anaerobic methane oxidation,N-DAMO)过程被发现,人们对自然界的碳氮循环有了全新的认识,该过程成为自然生态系统中温室气体甲烷的汇,同时还是氮污染的消减途径。本文系统介绍了N-DAMO过程反应机理以及参与该过程的亚硝酸盐型厌氧甲烷氧化细菌(Candidatus Methylomirabilis oxyfera)的生理生化特征,并对研究该功能菌的分子微生物方法进行了汇总。通过对不同自然生境中该细菌的研究报道进行总结分析,揭示各生境中年均降水量、年均温度、所处不同自然区等大尺度宏观环境因子及碳源、氮源、pH和氧气含量等生存因子对其群落结构的潜在影响,最后在展望中提出此功能菌在未来可深入研究的方向,期望能厘清厌氧甲烷氧化过程及其功能菌在碳、氮循环中的生态学功能。     

Draft genome sequence of Bacillus amyloliquefaciens HB-26

Bacillus amyloliquefaciens HB-26, a Gram-positive bacterium was isolated from soil in China. SDS-PAGE analysis showed this strain secreted six major protein bands of 65, 60, 55, 34, 25 and 20 kDa. A bioassay of this strain reveals that it shows specific activity against P. brassicae and nematode. Here we describe the features of this organism, together with the draft genome sequence and annotation. The 3,989,358 bp long genome (39 contigs) contains 4,001 protein-coding genes and 80 RNA genes.     

Design and expression of a synthetic phyC gene encoding the neutral phytase in Pichia pastoris

The 1074-bp phyCs gene (optimized phyC gene) encoding neutral phytase was designed andsynthesized according to the methylotrophic yeast Pichia pastoris codon usage bias without altering theprotein sequence.The expression vector,pP9K-phyCs,was linearized and transformed in P.pastoris.Theyield of total extracellular phytase activity was 17.6 U/ml induced in Buffered Methanol-complex Medium(BMMY) and 18.5 U/ml in Wheat Bran Extract Induction (WBEI) medium at the flask scale,respectively,improving over 90 folds compared with the wild-type isolate.Purified enzyme showed temperature optimumof 70℃ and pH optimum of 7.5.The enzyme activity retained 97% of the relative activity afterincubation at 80℃ for 5 min.Because of the heavy glycosylation the expressed phytase had a molecularsize of approximately 51 kDa.After deglycosylation by endoglycosylase H (EndoH_f),the enzyme had anapparent molecular size of 42 kDa.Its property and thermostability was affected by the glycosylation.