扁蓄总黄酮提取方法的比较研究

目的:筛选扁蓄总黄酮的最佳提取方法和提取工艺.方法:以扁蓄总黄酮的提取率为指标,分别采用乙醇回流法、超声波法和微波法提取扁蓄总黄酮,通过正交试验对提取工艺中的温度、固液比、提取功率及时间等技术参数进行考察,使用分光光度法测定扁蓄总黄酮含量.结果:回流提取扁蓄总黄酮提取率为1.09%,超声波提取扁蓄总黄酮的最佳条件为温度80℃,固液比1:10,功率700 W,提取2次,每次20 min,提取率为1.67%,微波法提取扁蓄总黄酮的最佳条件为温度100℃,功率700 W,固液比1:20,提取2次,每次10min,提取率为1.98%.结论:微波提取法提取扁蓄总黄酮具有高效、省时、节能等优点,在中药提取中有良好的应用前景.     

生物含磷大分子与铀酰相互作用模拟计算研究

【目的】针对UO₂²⁺_主要在生物细胞表面生成微纳米片状磷酸氢铀酰矿化体这一前期研究基础。【方法】本文采用模拟计算的方法,探究了磷脂（生物共有）、脂多糖（革兰氏阴性菌特有）、磷壁酸（革兰氏阳性菌特有）、植酸（植物特有）4种生物壁膜及胞外含磷大分子（biological macromolecules with phosphorous,BCP）与UO₂²⁺_之间的相互作用力、作用能和间距等。【结果】蒙特卡罗分析结果表明：在弱酸性(UO₂²⁺₎、中性至弱碱性(UO₂²⁺_与CO32–共存)两种体系下,BCP对UO₂²⁺_的吸附均容易发生,吸附能分布在–109 kcal/mol至–114 kcal/mol之间。分子动力学结果显示,UO₂²⁺     

枸杞子提取液抗氧化活性的研究

用Folin-Ciocalteu法、DPPH法和Fenton法分别对脱脂及未脱脂枸杞子的水和50%、80%、95%乙醇提取液的抗氧化活性进行测定。结果显示:3种方法所得结果具有一致的规律,相同提取条件下,未脱脂枸杞子的抗氧化活性大于脱脂枸杞子;随着乙醇浓度增大,枸杞子提取液的抗氧化活性逐渐减小,即水>50%乙醇>80%乙醇>95%乙醇枸杞子提取液。表明枸杞子中水溶性提取物的抗氧化活性高于脂溶性提取物;不同提取液抗氧化能力的差异说明枸杞子的抗氧化能力是枸杞子中水溶性和脂溶性多种成分协同作用的结果。     

稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白细胞的构建

获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro通过脂质体介导法共转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选后得到重组细胞株HEK293-HA,通过流式细胞术法(FCM)来检测细胞中HA的表达情况。所得到的重组细胞经扩大培养后再连续培养15代,采用间接免疫荧光法(IFA)和蛋白免疫印迹法(WB)来检测HA蛋白表达的稳定性。结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)-HA经双酶切及测序鉴定正确;共获得3株高表达阳性细胞株。细胞扩大培养后连续传代培养15代后进行Western blot和IFA检测结果表明,重组细胞的HA蛋白得到稳定的表达。已成功获得了能稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞,可为乙型流感病毒HA蛋白的进一步研究提供良好的基础。