生物工程技术在实验小鼠生物净化上的应用

目的采用体外受精的技术,对L858R、TL清洁级小鼠,以及来源于野外的中华小家鼠,和感染肺炎克来伯氏菌的Balb/c-nu裸鼠进行生物净化。方法对于需要净化的小鼠的雄鼠,采集附睾的精子,放入HTF溶液中获能,然后加入经过超排的卵团,体外受精。20-22 h后,挑选形态正常的二细胞胚胎,在净化实验室,移植给假孕的SPF级ICR母鼠,待产仔。仔鼠断奶后,随机选择仔鼠及带奶母鼠送检。结果体外受精的胚胎,经过移植后,均顺利产仔;仔鼠及母鼠的微生物级别,均达到SPF级。结论对于微生物级别较低的实验小鼠,采用在洁净实验室内做体外受精、胚胎移植的方法,可以提高实验小鼠的微生物级别。     

Mus和Rattus属鼠类下颌骨形态特征测量分析系统建立

目的建立高精度低误差的《Mus和Rattus属鼠类下颌骨形态特征测量分析系统》。方法运用Microsoft Visual Basic6．0语言设计程序,自动测量、计算、分析下颌骨形态特征。实例运行评估其可操作性。结果本系统可提高测量精度28倍,减少计算误差40余倍。可适用于Mus和Rattus属的野生动物、实验动物的下颌骨形态特征测量分析。结论《Mm和Rottus属鼠类下颌骨形态特征测量分析系统》具有成为可操作的遗传检测方法。     

遗传性BALB／c白内障小鼠模型培育初报

在生产实践中发现了两只自然突变的白内障雄小鼠,后与BALB／c和C3H／HEJ雌鼠交配,它们的后代雌雄均有白内障个体出现,提示这是一个常染色体显性基因。用传统的方法与BALB／c回交,试图把白内障基因导入BALB／c品系中．旨在建寺一个溃传性BALB／ccat/Cat白内障小鼠模犁。     

小鼠白内障基因突变方式、分布及基因定位

哺乳动物发育相关的功能基因的鉴定多来源于自发或诱发突变的小鼠。小鼠白内障作为较易鉴定的性状,目前业已明确的突变多达140余个。自发突变的小鼠主要来源于大规模饲养,诱发突变主要通过X射线与ENU处理获得,基因敲除与转基因小鼠亦可获得白内障性状。已知的白内障相关基因分布于小鼠20条染色体,其中以1号染色体最多,并常于小鼠胚胎时期起始表达。小鼠白内障表型多由单基因突变引起,突变的确定主要通过F2代家系全基因组扫描、精细定位、单倍型分型与测序验证等程序。本文从小鼠白内障基因突变来源、基因分布、基因定位与基因表达等角度较为全面的阐述了小鼠先天性白内障的研究进展。     

小家鼠和实验小鼠遗传特性的比较研究

本文用同工酶电泳法、微量细胞毒法和免疫双向扩散法对我国4个动物地理区的6个采集点的156个小家鼠(Mus musculus)进行了遗传特性的调查。结果发现:在全部被测的13个位点中,小家鼠在7个位点上存在着多种实验小鼠中罕见的基因组成;而不同动物地理区和亚区的小家鼠的遗传特性又各不相同。从而指出将小家鼠的特有基因导入实验小鼠,培育新品系的重大意义。     

不同品系实验小鼠6种脱氢酶同工酶的比较研究

本文采用0.5mm超薄层水平板状聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦技术,对A/wy,AKR/J,A2G/J,BALB/cA,CBA/N,C3H/HeJ,C57BL/6N,DBA/2J,129/J等9个近交系小鼠品系的MEs,MEm,ADH,LDH,MDHs,MDHm等6种脱氢酶同工酶作了等电点测定和分析。依据等电聚焦酶谱,比较研究了酶谱类型和酶活性差异与代谢功能的关系以及与基因变异的关系。结果显示:ADH-r1酶谱型为对乙醇低氧化能力型,ADH-r2酶谱型为对乙醇高氧化能力型。C57BL/6N的胃ADH同工酶谱与众不同,特征酶带p16.87为r2型,属酒精高嗜性品系;其余品系的胃ADH同工酶谱为ADH-r1型,均为酒精低嗜性品系。DBA/2J的肾MDHs同工酶谱为基因变异引起酶活性改变的类型,其中p14.90,p14.99,p15.05等 3条酶带较其它品系的同位酶带活性高,由此推断DBA/2J的肾具有更强的糖异生能力和机体抗饥饿能力。 LDH同工酶等电聚交酶谱表现出极丰富的多态性,鉴于LDH在生物进化中具有的重要地位,作者认为LDH可作为实验动物育种、保种、野生动物实验动物化遗传质量监测的生化标志基因临界位点。超薄层等电聚焦技术具有其它电泳所不具备的优点,作为实验动物遗传质量监测技术更其精确性,值得推荐。     

绵羊红细胞分离猪的T细胞方法

参照人的T细胞分离方法用于猪T细胞分离,经二次绵羊红细胞分离的T细胞,用PHA从功能上鉴定获得纯度很高的T细胞,能进一步用于有关T细胞方面研究。     

基于PCR-LDR平台的近交系小鼠遗传质量快速检测方法

目的建立基于PCR-LDR平台的近交系小鼠SNP快速分型方法,用于检测实验小鼠的遗传质量与品系纯度。方法利用可移植性极高的PCR-LDR技术,以常见近交系小鼠为研究对象,选取了21条染色体上的45个SNP位点,分别设计引物和探针,经过筛选和验证,建立了多重PCR-LDR(polymerase chain reaction and ligase detection reaction,PCR-LDR)分型方案。结果四组多重PCR-LDR可实现45个SNP位点的基因分型,其中43个、44个与45个SNP在样本中的检出率分别为100%、90.9%与36.4%。所有样本经分型确定为纯合体,并得到了常见近交系小鼠SNP位点信息。结论实现了常见近交系小鼠快速、高通量的基因分型,可用于遗传质量检测和品系鉴定。     

中国小型猪胚胎生殖细胞的培养和建系

首次报道分别从28天和27天中国小型猪胚胎生殖嵴的原始生殖细胞培养和建立了两株胚胎生殖细胞系(embryonic germ cells,EG cells),各命名为BPEGl和BPEG2。根据它们的生长形态、细胞专一性标志以及体内、外分化等特征,证明了它们具有多能性的特性。这些猪EG细胞具有潜在的应用前景。