人卵母细胞样细胞体内分化模型的建立

干细胞通过诱导培养,在体外能够分化为卵母细胞样细胞 (Oocyte-like cell, OLC),将其置于体内环境能够有效地改善OLC的质量和发育能力。通过检测猪卵泡液中激素和Bmp 15蛋白的含量,选取了中等卵泡的卵泡液对人羊水干细胞进行体外诱导培养,10 d后,经实时定量PCR检测发现,早期生殖细胞样细胞团高表达生殖基因oct4和重新甲基化转移酶基因dnmt3b。将这些细胞团用猪卵泡膜包裹后形成移植物,移植到小鼠肾被膜下。1个月后取出移植物,发现移植物内的细胞在形态上,不仅与正常的卵母细胞极为相似,而且还表达生殖细胞和卵母细胞特异标记基因 (oct4、nanog、stella、ifitm3、dazl、nanos3、bmp15和gdf9)。证明技术体系能够有效改善OLC的形成和发育能力。     

层粘连蛋白基因家族在猪多能干细胞中的表达谱分析

层粘连蛋白(Laminin)是细胞外基质的重要成分,对细胞生长、分化、运动、组织修复和再生等发挥重要调节作用。Laminin包括有A1-5、B1-4和C1-3共12个编码基因,以不同的表达模式发挥功能。其中Laminin A5作为可以支持多能细胞生长的重要基因,得到广泛研究。但是,在所有猪相关数据库中,均未能查到Laminin A5的信息。文中通过生物信息学分析,首次确认了猪Laminin A5的存在,并进行了克隆和测序验证。为揭示Laminin基因家族在猪诱导多能干细胞(i PSCs)中的表达特性,检测了Laminin在猪各组织、体细胞和i PS细胞中的不同表达模式。发现Laminin B1基因在猪多能干细胞中存在特异性可变剪接体(LAMB1-a),且该可变剪切体的表达量与猪多能干细胞的重编程程度呈正相关。为进一步揭示和利用Laminin作为细胞外基质,用于猪多能干细胞的获取和培养优化奠定了基础。     

人卵母细胞样细胞体内分化模型的建立

赋予抗TNF-α 单链抗体片段 (TNF-scFv) 对炎症组织的特异性,用一段来自人清蛋白 (HSA) 的柔性连接肽在基因水平上连接TNF-scFv和抗B型纤维连接蛋白 (B-FN) 的额外域B (ED-B) 的scFv L19,构建了抗TNF-α/抗ED-B单链双特异抗体BsDb,其中B-FN为炎症组织中特异表达的抗原。BsDb在毕赤酵母中获得了分泌表达,表达产物经鉴定和纯化制备后,进行了功能分析。结果表明,BsDb保留了其亲本抗体TNF-scFv和L19对抗原的免疫反应性,能够同时结合TNF-α和ED-B,并中和TNF-α的生理作用。而且,BsDb对抗原的亲和力及中和能力与大肠杆菌包涵体来源的亲本抗体相比显著增强。在小鼠佐剂型关节炎 (AIA) 模型中,BsDb能选择性地积累和保留于小鼠的炎症关节,并快速从血浆中清除。说明BsDb兼备炎症组织的特异性和正常组织的低毒性,在类风湿关节炎及其他慢性炎症性疾病的治疗上具有较大潜力。     

参芪扶正注射液联合多西他赛对乳腺癌患者外周血象、免疫功能及血清肿瘤标志物的影响

摘要 目的：观察参芪扶正注射液联合多西他赛对乳腺癌患者外周血象、免疫功能及血清肿瘤标志物的影响。方法：选取2018年1月~2019年12月我院收治的64例乳腺癌患者,根据信封抽签法将患者分为对照组（n=32,多西他赛治疗）和研究组（n=32,参芪扶正注射液联合多西他赛治疗）。对比两组疗效,对比两组治疗前、治疗2个疗程后的外周血象、免疫功能及血清肿瘤标志物,记录两组治疗期间不良反应情况。结果：比较两组不良反应无差异（P>0.05）。治疗2个疗程后,对照组的总有效率为43.75%（14/32）,研究组的总有效率为68.75%（22/32）,研究组的总有效率高于对照组（P<0.05）。治疗2个疗程后,两组血红蛋白、血小板、白细胞水平均较治疗前下降,但研究组高于对照组（P<0.05）。两组CD3⁺、CD4⁺/CD8⁺、CD80、CD86水平均较治疗前下降,但研究组高于对照组（P<0.05）。治疗2个疗程后,两组癌胚抗原（CEA）、糖蛋白 125（CA125）、糖蛋白 153（CA153）水平均较治疗前下降,且研究组低于对照组（P<0.05）。结论：参芪扶正注射液联合多西他赛治疗乳腺癌患者,可有效减少肿瘤标志物分泌,抑制肿瘤生长,减轻机体免疫抑制,改善外周血象,且安全可靠。