破伤风毒素C片段基因克隆、重组表达及免疫原性研究

应用PCR技术从破伤风梭状芽孢杆菌DNA中扩增出1．4kbDNA基因,将其克隆到pUC18质粒中,经测序证明该DNA片段为破伤风片段C的基因,并将此基因片段亚克隆到pGEX-4T-2,构建成表达质粒pGEX－TC在E．coli中进行表达。经聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹鉴定,表达产物为76KD的特异性重组蛋白。动物实验显示：1μg重组蛋白免疫动物,可使动物产生1IU／ml的破伤风抗毒素单位,动物血清的抗体滴度可达1：800。