基于非培养和培养的方法比较花生根瘤菌遗传多样性

摘要:【目的】比较非培养和培养方法揭示的花生根瘤菌遗传多样性差异,以期建立慢生根瘤菌快速检测占瘤率技术。【方法】采用经典分离培养技术获得花生根瘤菌和非培养方法直接从根瘤中收获类菌体分别提取DNA后,比较分析BOX-PCR指纹图谱,根据多样性指数评价基于非培养和培养方法的BOX-PCR指纹图谱技术揭示花生根瘤菌遗传多样性的差异。【结果】基于非培养方法检测的花生根瘤类菌体为81.8%,获得85种遗传群;基于培养方法分离花生根瘤菌菌株为72.7%,获得71种遗传群;两种方法共同检测到17种 BOX-PCR遗传图谱相一致。根据多样性指数基于非培养方法反映不同地区花生根瘤菌遗传多样性结果较一致,基于培养方法反映各地区的花生根瘤菌遗传多样性结果存在明显差异。【结论】基于非培养方法检测根瘤类菌体的遗传多样性,能够更快速、真实反映不同土壤花生根瘤中的优势遗传群,快速地统计根瘤菌菌株占瘤率;与培养方法相结合有利于获得花生根瘤菌竞争结瘤能力强的土著菌株,从而为筛选高效根瘤菌菌株奠定基础。     

大剂量氨溴索对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究

目的：评价大剂量盐酸氨溴索（沐舒坦）对肺缺血再灌注损伤（Lungischemiareperfusioninjury,LIRI）的保护作用及其机制。方法：实验选取sD大鼠36只,分为三组：缺血再灌注损伤组;沐舒坦干预组;手术对照组。对大鼠进行左侧开胸并阻断左肺门根部60min,然后进行再灌注6h。沐舒坦干预组再灌注开始时,经股静脉持续6h输入沐舒坦溶液（3．75mg·kg-1．h-1）。分别检测大鼠动脉血氧分压,肺组织湿／干重比值,氧化应激因子（MDA,SOD,GSH-PX）含量,髓过氧化物酶（MPO）活力,细胞因子（TNF-α、MCP-1、TGF-β1）基因mRNA的表达水平,光镜下观察病理组织学改变。结果：（1）大剂量沐舒坦干预后,肺间质水肿、炎症细胞浸润、肺泡内出血、渗出等较再灌注损伤组明显改善（P〈O．05）;肺组织湿／干重比值显著降低（P〈0．05）;动脉血氧分压明显改善（P〈0．05）。（2）大剂量沐舒坦干预后,肺组织MDA、SOD、和GSH—PX含量基本降至正常水平;MPO活力降至手术对照组水平;差异均明显低于缺血再灌注损伤组（P〈0．05）。（3）沐舒坦干预组的TNF-α,MCP-1,TGF．B1基因mRNA表达水平在药物干预后虽未能恢复至正常水平,但是较缺血再灌注损伤组明显降低。结论：大剂量沐舒坦可参与下调肺组织的MDA、SOD、GSH．PX的含量和MPO活力,并通过下调TNF-α、MCP．1、TGF-β1基因rnRNA的表达水平达到减轻LIRI损伤程度的目的。本研究结果表明,沐舒坦通过调控uRJ在形成过程中相关基因的表达来抑制氧化应激损伤,从而有效的减轻肺缺血再灌注损伤。