基于同源重组的裂殖壶菌遗传转化体系的构建及验证

【目的】裂殖壶菌是一种能高效生产DHA的海洋真菌;基因工程技术已经成功应用在微生物改造和代谢机理研究中,利用基因工程技术对裂殖壶菌进行改造首先需要构建适合裂殖壶菌的遗传转化体系;【方法】本文利用电转化的方法将含有18S r DNA同源重组片段的ble基因导入裂殖壶菌中,通过zeocin抗性平板筛选出阳性菌株,并设计ble基因引物,以裂殖壶菌基因组为模板,进行PCR验证ble基因是否成功结合到裂殖壶菌染色体上。【结果】筛选获得的抗性菌株基因组上确实PCR出ble基因片段,对改造菌株与原始菌株进行发酵培养,发现改造后菌株在生物量、油脂含量、DHA含量及脂肪酸分布等方面和原始菌株基本一致。【结论】抗性基因的插入不会影响菌株的正常代谢,该体系的构建为后续其他外源基因导入奠定基础。     

农用抗生素产生菌105N_1的研究

我们从1977年开始,进行了防治麦类赤霉病的农用抗生素筛选工作。经过包括盆栽和大田小区防治试验,得到一株效果显著的链霉菌,编号为105N_1。现将该菌株的生物学特征及对     

金黄色葡萄球菌血流感染治疗失败的相关危险因素分析

目的分析金黄色葡萄球菌血流感染(SA-BSI)临床治疗预后的相关因素。方法回顾性分析浙江大学医学院附属第一医院191例确诊为SA-BSI患者临床资料,以30d为节点,分为临床治疗成功组和临床治疗失败组。分析两组患者临床特征、APACHE II评分(Acute Physiology and Chronic Health Evaluation Scoaring)、感染来源危险分层、感染性休克发生率、早期治疗反应、是否耐甲氧西林、既往血培养阳性和万古霉素药敏等情况。结果 191例患者中治疗失败组与成功组相比有更高的APACHE II评分,感染来源危险分层高、感染性休克发生率高、缺乏3d早期治疗反应,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌感染比例高;在多元回归分析中,早期治疗反应的缺乏与感染性休克发生、既往血培养阳性、多重感染源为30d治疗失败的独立预测因子。结论早期治疗反应是预测治疗失败最有力的因子。