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为探究米曲霉(Aspergillus oryzae)孢子适用于双向电泳的最佳破壁方法,采用5种不同的破壁方法对米曲霉孢子进行破壁,用血球计数板进行破壁率计算,Bradford方法测定释出的可溶性蛋白含量,并进行双向电泳可行性验证。结果表明,在普通光学显微镜下,破壁后的米曲霉孢子多为碎片,极少数为孢壁内空圆球。5种破壁方法中石英砂研磨+超声、液氮研磨、MP·Fast-prep均质器法在孢子浓度较低(107个/m L)时破壁效果较佳,但是随着孢子浓度的不断提升(109个/m L),只有均质器法能保证较高的破壁率,破壁率高达90%,且适用于双向电泳的蛋白质提取。 相似文献
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