Wistar大鼠C6胶质瘤模型中的肿瘤消退现象研究

目的:建立Wistar大鼠C6胶质瘤模型,研究其生物学特性(病理特性,新生血管特性,模型最佳应用时间段,肿瘤自发消退现象)并对其进行MRI动态扫描观察,了解肿瘤的自然生长规律,与人脑胶质瘤的自然生长规律相比较.方法:Wistar大鼠40只,分成2组,一组30只,二组10只,分别将C6胶质瘤细胞悬液和DMEM培养基立体定向接种于大鼠的右侧尾状核,分别于接种后7,14,21,28,35,50天进行增强MRI扫描,了解肿瘤生长特性,脑组织水肿情况,肿瘤消退现象等.于荷瘤鼠死亡当日取脑组织,液氮速冻后行脏染色,抗CD31免疫组化检查.结果:大部分肿瘤模型于接种后7天可在MRI上见到肿瘤生长,14-28天为快速增长期,并有大量新生血管形成,脑屏障严重破坏,大部分荷瘤鼠死于28天内,有3只大鼠20天以后出现肿瘤自发消退现象,病理切片可见大量炎细胞浸润,肿瘤内部出现软化灶.结论:立体定向建立大鼠C6胶质瘤模型与人脑胶质母细胞瘤具有相似性,部分荷瘤鼠在5周左右有肿瘤自发消退,肿瘤新生血管于7天开始出现并增多,4周后基本趋于稳定.因此利用此模型进行试验研究的最佳时期在14-28天.     

MMP-2及TIMP-2的表达与胶质瘤复发相关性的研究

目的:探讨基质金属蛋白酶类与胶质细胞瘤浸润性生长之间的关系及其在胶质瘤复发中的作用。以及基质金属蛋白酶及其抑制因子(MMP-2、TIMP-2)的阳性表达与胶质细胞瘤病理分级及预后的关系。方法:应用免疫组织化学染色法(SP法)检测48例人脑原发和复发胶质细胞瘤组织中MMP-2、TIMP-2的表达。结果:Ⅲ、Ⅳ级和复发胶质细胞瘤中的MMP-2蛋白的表达显著高于Ⅰ、Ⅱ级(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ级胶质细胞瘤中的TIMP-2蛋白的表达显著高于复发胶质细胞瘤(P<0.05)而与Ⅲ、Ⅳ级细胞瘤无显著性差异(P>0.05);Ⅲ、Ⅳ级和复发胶质细胞瘤中的MMP-2,TIMP-2蛋白的表达无显著差异(P>0.05);同级别胶质细胞瘤中MMP-2、TIMP-2的表达之间无明显相关性(P>0.05);正常脑组织中无表达。结论:MMP-2、TIMP-2的表达与胶质细胞瘤的恶性程度有关,低级别中,MMP-2与TIMP-2成正相关;MMP-2的高表达,TIMP-2的低表达与胶质细胞瘤的侵袭有关,MMP-2、TIMP-2的表达水平有可能成为判定胶质细胞瘤恶性程度、侵袭能力和预后的诊断指标,而且TIMP-2可能更加敏感。     

显微手术夹闭颅内动脉瘤手术疗效分析

目的：探讨显微手术夹闭颅内动脉瘤手术的疗效。方法：回顾性分析自2005年10月至2010年10月期间开颅行夹闭颅内动脉瘤手术的39例患者的临床资料。结果：除有1例死亡外,其中29例恢复良好,能生活自理,7例伴有轻度残疾,需人照顾,2例重残,需要卧床。结论：夹闭颅内动脉瘤手术获得了较好的疗效,我们发现避开血管痉挛发生的高峰期即可达到较好的疗效,即在3日内或14日后实行手术较为适宜。     

脑挫裂伤致miR-9升高促进神经干细胞分化

目的：探讨颅脑损伤后miR-9表达的变化和对神经干细胞分化和增值的影响,为颅脑损伤后神经功能修复治疗提出新的思路。方法：通过RT-PCR技术检测miR-9在挫裂伤脑组织中的表达情况;培养胚胎来源神经干细胞,并通过免疫荧光鉴定神经干细胞及其分化;转染miR-9后,通过MTT测定神经干细胞的增殖情况,和流式细胞仪检测分化神经元所占比例。结果：miR-9在挫裂伤脑组织中表达显著上升。对神经干细胞过表达miR-9可显著促进细胞增殖,并诱导分化成神经元。结论：脑挫裂伤时miR-9显著升高,并具有着促进神经干细胞增值和诱导分化的作用,可为伤后神经功能修复提供新的治疗方法。     

慢病毒介导EGFP转染骨髓间充质干细胞在胶质瘤模型中迁移分布的研究

目的:如何证实骨髓间充质干细胞(BMSCs)是胶质瘤基因治疗中最好的药物载体?将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)标记的大鼠骨髓间充质干细胞移植入大鼠C6胶质瘤模型脑内,观察骨髓间充质干细胞在肿瘤内的迁徙与定位。方法:贴壁法培养大鼠骨髓细胞获取纯化的BMSCs。慢病毒介导EGFP转染BMSCs,于荧光显微镜下观察EGFP的表达,并行流式细胞仪检测EGFP阳性转染率。利用立体定向仪将培养好的C6细胞注入大鼠脑内,建立大鼠脑内胶质瘤模型。将标记EGFP的BMSCs利用微量注射器注入模型鼠脑内;移植后第1,7天处死大鼠,用荧光显微镜观察BMSCs在肿瘤内的迁移分布。结果:实验成功建立了大鼠脑内胶质瘤模型。以EGFP标记的BMSCs在模型鼠脑内主动迁移分布于肿瘤内部及肿瘤与正常脑组织交界侧。结论:骨髓间充质干细胞可以作为肿瘤基因治疗的良好载体。     

干细胞移植对鼠脑缺血再灌注损伤后STAT3和bcl-2蛋白表达的影响

目的：通过检测神经于细胞移植后Wistar大鼠脑缺血再灌注损伤后局部STAT3蛋白和bcl—2蛋白表达水平的变化,来研究移植入的神经千细胞对损伤后神经细胞的凋亡抑制作用和可能的机制。方法：SPF级SD大鼠20只,以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为2组,模型组（对照组）10只,干细胞移植组（治疗组）10只。取孕14天的Wistar胎鼠脑皮质神经干细胞培养至第三代,于损伤后的24小时立体定向注射植入成年Wistar大鼠脑缺血损伤局部。于移植后48小时处死鼠取脑,免疫组化检测bcl-2蛋白和westernblot法检测STAT3蛋白表达的变化差异。结果：移植入神经干细胞后,实验组局部STAT3蛋白和bcl-2蛋白的表达都比对照组明显的增强,差异具有统计学意义（P〈0．01）。结论：移植入的神经干细胞通过上调STAT3蛋白和bcl-2蛋白的表达,发挥局部神经元的抗凋亡作用,减轻局部缺血再灌注损伤,保护神经功能。