排序方式： 共有3条查询结果，搜索用时 15 毫秒
1
1.
K202A突变对扩展青霉脂肪酶热稳定性的影响 总被引：2，自引：0，他引：2
利用易错PCR定向进化扩展青霉脂肪酶（PEL）,获得了一株热稳定性有所提高的随机突变体（ep8）,ep8包含有一个氨基酸的改变。为进一步提高其热稳定性,作者利用重叠延伸PCR法,以ep8基因为模板,将第202位赖氨酸突变为丙氨酸（K202A）,构建表达质粒pAO815-ep8-K202A。并将其引入毕赤酵母GS115构建叠加突变体(PEL-ep8-K202A)。同时以野生型lip07为模板构建单点突变体:PEL-lip07-K202A。15% SDS-PAGE 结果分析表明突变体分子量与野生型一致,约为28KD. 表达产物热稳定性分析结果表明: 野生型（PEL）的Tm值为39.03℃,而以野生型为模板进行定点突变得到的单点突变酶（PEL-lip07-K202A）,其Tm却降低了2℃,为37.08℃。叠加突变酶(PEL-ep8-K202A)的Tm为41.66℃, 比野生型酶提高2.63℃,比随机突变体ep8生产的酶（PEL-ep8）的Tm提高了1.21℃。 相似文献
2.
脂肪酶催化合成生物柴油的瓶颈问题及其对策研究进展 总被引：3，自引：0，他引：3
生物柴油,一种新型的清洁能源燃料,具有可再生、可生物降解、环境友好等优良的品性,可部分或全部替代石化柴油。碱催化法、脂肪酶催化法及超临界法是合成生物柴油的主要工艺,其中脂肪酶催化法是一种节能型、环保型工艺,在节能和环保方面,有着碱催化法无可比拟的优越性,具有良好的工业应用前景。但目前在实现产业化的进程中仍存在如酶成本高、稳定性较差、甲醇对酶的失活效应及反应时间长等瓶颈问题。通过固定化技术和全细胞催化剂的采用、甲醇流加方式的改进、溶剂工程的改善及酰基受体和耐醇酶的开发等技术手段,结合固定床生物反应器,较好地解决了这些瓶颈问题,从而推进了酶催化法合成生物柴油的工业化进程。本文主要对酶法合成生物柴油工艺存在的主要问题及相应对策研究进展进行概括介绍,并对其工业化发展前景进行讨论。 相似文献
3.
根据蛋白质变性后结构变化的特点和荧光探针8-苯胺基-1-萘磺酸 (8-Anilino-1-naphthalenesulfonic acid,ANS) 的特性,建立了一种快捷而准确的脂肪酶热稳定性 (Tm) 测定的新方法——ANS脂肪酶稳定性测定法,即将脂肪酶在25 ℃~65 ℃的不同温度下保温30 min后,加入到ANS反应体系 (0.2 mg/mL酶蛋白,0.05 mmol/L ANS,20 mmol/L Tris-HCl (pH 7.2),100~500 mmol/L NaCl) 中。在激发波长378 相似文献
1