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在以往构建的JEV疫苗株SA14-14-2感染性克隆pBRkpn-JTF的基础上,构建了去除JEV结构区域基因(prM基因和E基因),保留非结构区域基因的复制子表达载体pCTCJEV、pCTMJEV,转染BHK-21细胞后,通过反转录PCR(RT-PCR)和间接免疫荧光实验(IFA)检测该载体的自主复制能力和蛋白表达情况,结果证实该载体在BHK-21细胞中能够自主复制并且表达非结构蛋白。进一步在该载体中插入报告基因EGFP,检测外源蛋白的表达情况,结果显示在转染复制子载体的24h后,荧光显微镜下能够看见绿色荧光蛋白的表达,阳性信号持续增强,能够维持10d左右,证实了构建的复制子载体pCTCJEV能够有效地表达外源蛋白,这为进一步建立以乙脑病毒复制子为基础的疫苗载体系统打下基础。 相似文献
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二氯甲烷降解菌的紫外线诱变及降解工艺条件的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
无碳查氏平板上稀释涂布降解菌,平板倒置,皿盖中央放一块无菌棉花吸附二氯甲烷,利用二氯甲烷在培养温度下的特性,提供气态碳源供菌生长,可获得非水溶性有机废气降解菌的单菌落。二氯甲烷降解菌经鉴定为假单胞菌、盐杆菌和放线菌分枝杆菌。经紫外线诱变处理,混合突变株摇瓶降解工艺条件:2^#培养基、pH7.0、温度25-28℃、摇床转速100转/分。温度高转速快二氯甲烷挥发多,菌体能利用的碳源少从而影响的生长和降解,应用本研究工艺,控制进气量小于1.5mg/L,在生物膜填料塔中发大试验,二氯甲烷的降解率达85%。 相似文献
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据全国老龄委办公室新近发布的人口统计资料显示,我国已快速进入老龄化社会。到2012年底,全国60岁及以上的人口数量将达到2个亿,逼近全国人口总量的15%,老龄人口还将以每年1 000万人的速度递增。因此,与人口老龄化密切相关的神经退行性疾病(如阿尔茨海默氏病、帕金森病)的患病人数也将随之不断上升,对这些疾病目前只有对症治疗的方法。如何通过发病机理的研究寻找延缓这些疾病进展的有效方法是近年来神经科学研究领域关心的一个重要课题。 相似文献
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