博尔纳病病毒磷蛋白细胞模型的构建与鉴定

目的建立博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)磷蛋白的细胞模型,并对所建模型进行鉴定。方法重新扩增和鉴定已有的BDV磷蛋白(GFP-P24)质粒,使用转染试剂将该质粒转入PC12细胞,并用荧光定量PCR和ELISA的方法对所构建的细胞模型进行鉴定。结果重新扩增的质粒PCR鉴定阳性,其浓度符合转染的需要,测序后未发现核苷酸的突变;转染PC12细胞的效率高,荧光定量PCR和ELISA检测均为阳性。结论成功构建了BDV磷蛋白的细胞模型,为研究BDV感染过程中磷蛋白所起的作用奠定了基础。     

人氟斑牙釉质表面结构及漂白后改变的电镜观察

目的:目前国内外对氟斑牙的研究主要集中在流行病学调查和临床疗效分析,对其漂白后釉质表面脱矿程度的研究却鲜有报道.观察不同程度人氟斑牙电镜下微观结构的特点,了解冷光美白对不同程度人氟斑牙釉质表面的影响,探讨冷光美白对重度氟斑牙的安全性.方法:选择因牙周病拔除的完整无龋坏的正常牙10颗,人各型氟斑牙50颗,选取颊侧典型区域制备标本.氟斑牙标本按Dean氏分类法分为轻、中、重度3组,正常牙标本作为对照组.各组标本随机分为4个亚组,A组:不做任何处理;B组:釉质表面蚀刻;C组:釉质剖面蚀刻;D组:釉质表面冷光美白,扫描电镜下观察标本的表面形貌.结果:轻度氟斑牙釉柱间隙增宽,少量晶体排列紊乱,晶间隙增宽.重度氟斑牙釉质表面凹凸不平,呈弹坑状或蜂窝状,釉柱轮廓不清,晶体排列紊乱甚至消失.中度氟斑牙居于二者之间.冷光美白后,正常牙和氟斑牙釉质表面低倍镜下均未见明显改变,高倍镜下散在浅碟状凹坑;中重度氟斑牙还伴有大量粟粒状小孔.结论:随着氟斑牙严重程度的加重,釉质表层损害程度加重.冷光美白造成釉质表层的轻微脱矿,氟斑牙稍重于正常牙.从结构和漂白后釉质表面脱矿程度方面进一步探讨氟斑牙的表面结构特点,从而为氟斑牙的临床治疗提供基础数据.     

抗博尔纳病病毒核蛋白多克隆抗体的制备和鉴定

目的利用重组博尔纳病病毒核蛋白进行动物免疫,制备多克隆抗体并对其进行鉴定。方法将重组载体pET14b-p40转化至感受态大肠埃希菌I,PTG诱导融合蛋白的表达,His-tag亲和层析纯化重组核蛋白并作为抗原免疫新西兰大白兔,收集免疫后血清,制备和纯化多克隆抗体,ELISA测定抗体效价,并进行Western-blot鉴定。结果成功制备出核蛋白多克隆抗体,ELISA检测效价高达1︰256000;该抗体与原核和真核系统中表达的核蛋白均能发生特异性反应。结论成功制备了效价和特异性良好的抗重组核蛋白多克隆抗体,为博尔纳病病毒血清免疫学检测方法的建立奠定了基础。