家蚕整合素Bmintegrin β1基因的克隆及表达

整合素作为一种跨膜糖蛋白,与生物体的生理和病理等多个过程密切相关。为了探究其在家蚕中扮演的角色,通过PCR及RACE技术克隆得到了家蚕整合素β家族成员Bmintegrinβ1,通过结构域预测网站对其结构域进行了预测,并构建进化树对其进化关系进行分析,此外通过原核表达系统及蛋白纯化方法获得其重组蛋白,使用重组蛋白免疫小鼠获得其多克隆抗体,并采用半定量PCR及Western blotting方法检测Bmintegrin β1的时空表达。文中得到家蚕整合素Bmintegrin β1的3种剪切形式,且这3种剪切体具有长为2 502 bp的开放阅读框架,编码833个氨基酸。根据预测该蛋白含有Integrin-B-tail、跨膜区等一系列整合素家族保守的结构域。进化树结果表明该蛋白与同为鳞翅目成员的烟夜蛾和黑脉金斑蝶的整合素蛋白最为接近。此外我们通过原核表达系统及亲和层析技术获得了高纯度的Bmintegrin β1蛋白,进一步制得多克隆抗体。并通过免疫印迹反应证明该抗血清能特异识别Bmintegrin β1重组蛋白。之后通过半定量PCR及免疫印迹检测,结果显示该蛋白在家蚕的各组织以及血细胞各时期均有较高表达且在血液中表达量最高。总之,这项研究为家蚕整合素家族的研究提供了基础。     

北坞园林绿地捕食性瓢虫发生规律及生态位的研究

为有效保护和利用园林绿地中的捕食性瓢虫资源,研究了北京园林绿地中瓢虫的发生规律及生态位。采用定点定期黄板诱集法调查园林绿地捕食性瓢虫资源,然后进行了瓢虫发生时序动态、生态位宽度及生态位重叠等分析。由生态位宽度将瓢虫分为种群竞争力强、中和弱3类,由Mcnaughton优势度指数也将瓢虫分为优势种、常见种和偶见种3类;异色瓢虫、龟纹瓢虫、红点唇瓢虫和菱斑巧瓢虫既是种群竞争力强的瓢虫种类,也是园林绿地瓢虫的优势种,种群竞争力中的瓢虫种类多为瓢虫常见种,弱的种类多为瓢虫偶见种;园林绿地中优势捕食性瓢虫的发生时序动态既与园林植物上发生的蚜虫种类相关,又与园林植物种类相关;异色瓢虫与龟纹瓢虫,异色瓢虫与红点唇瓢虫,以及龟纹瓢虫与菱斑巧瓢虫全年的生态位重叠指数较高,均达0.8以上,而异色瓢虫与菱斑巧瓢虫,龟纹瓢虫与红点唇瓢虫,红点唇瓢虫与菱斑巧瓢虫全年的生态位重叠指数较小,均低于0.7。本文为有效保护园林绿地中的瓢虫资源提供了技术支撑。     

家蚕B类清道夫受体BmSCRB8基因的克隆及表达

B类清道夫受体在动脉粥样硬化及其他心血管疾病的形成或抑制,机体免疫防御,凋亡细胞清除等生理过程中起着重要的作用。克隆了家蚕B型清道夫受体家族的一个成员BmSCRB8基因,通过RACE技术获得BmSCRB8的c DNA全长为2 668 bp,其ORF为1 704 bp,编码567个氨基酸,通过在线预测其蛋白分子量为63.87 k Da,等电点为6.06。采用RT-PCR方法得到了BmSCRB8的时空表达谱,结果表明BmSCRB8在家蚕各组织以及血液各时期均有表达,且在脂肪体中表达量最高,变态发育时期表达量较高。原核表达获得BmSCRB8重组蛋白,并经由蛋白纯化、免疫小鼠后制备得到家蚕BmSCRB8多克隆抗体。同时构建了BmSCRB8真核表达载体并转染家蚕胚胎细胞系。免疫荧光及过表达结果显示BmSCRB8主要定位于细胞膜上,Western blotting结果显示免疫小鼠后所得到的抗血清可特异性识别BmSCRB8蛋白。