褶纹冠蚌过氧化物还原酶6基因的克隆及原核表达

过氧化物还原酶6具有谷胱甘肽过氧化物酶和磷脂酶A2的双重活性,在机体抗氧化保护及肺表面活性物质代谢中具有重要的作用。研究克隆和分析了褶纹冠蚌Prx6(CpPrx6)基因的cDNA序列特征。结果表明CpPrx6基因的cDNA全长1617 bp;其中5′端非翻译区为71 bp,3′端非翻译区为889 bp,开放阅读框为657bp,可以编码218个氨基酸。CpPrx6氨基酸序列与其他已知贝类Prx6的同源性为70%—72%。CpPrx6蛋白含有1-Cys型Prx共有的保守催化中心"PVCTTE"和脂肪酶基序"GKSWA",三级结构中包含6个α螺旋、12个β折叠,催化中心位于第5个α螺旋内。CpPrx6基因在褶纹冠蚌血细胞、外套膜、闭壳肌、肝胰腺、鳃等组织中均有表达,其中鳃的表达量最大。嗜水气单胞菌刺激后6h和12h时CpPrx6在肝胰腺中的表达量明显增加(6h,P<0.05;12h,P<0.01),在血细胞和鳃组织中12h的表达量增加,24h时恢复到正常水平。将CpPrx6基因亚克隆到pET-32a(+)质粒中构建了重组质粒,SDS-PAGE分析发现重组质粒在大肠杆菌DE3中获得了表达。     

5种寄生蚌螨COI基因片段序列及系统发育分析

采用PCR技术对5种寄生蚌螨COI基因片段进行序列测定.序列分析的结果表明,比对后的序列总长度均为658 bp;其中A、G、C、T 4种碱基的平均含量分别为34.6%、20.2%、14.3%、30.9%,平均嘧啶含量（65.5%）明显高于嘌呤含量（34.5%）,说明碱基存在偏向性.弯弓蚌螨Unionicola arcuata与Y纹蚌螨U.ypsilophora 的种间遗传差异为26.4%,达到属间分类水平,结果支持Vidrine将沃蚌螨亚属从寄蚌螨亚属中分离的修订;螫爪蚌螨U.chelata与敏捷蚌螨U.agilex之间遗传差异为23.3%,达到属间分类水平,结果支持文春根等将敏捷蚌螨与其姊妹种腰蚌螨U.lumbaria放入韦蚌螨亚属中的修订.以营自由生活的厚蚌螨U.crassipes作为外类群,使用PAUP4.0b 10软件中的最大似然法（ML）和邻接法（NJ）构建系统树,结果显示：在5种寄生蚌螨中敏捷蚌螨可能是最早从祖先种分化出来的种;弯弓蚌螨与Y纹蚌螨可能起源于蚌螨属的同一个祖先.     

褶纹冠蚌alpha2巨球蛋白基因的分子克隆与序列分析

alpha2 巨球蛋白(α2M)是一类广谱的蛋白酶抑制因子, 存在于许多无脊椎或脊椎动物的血浆中1。它不仅可以与机体内过量的蛋白酶相结合产生α2M-蛋白酶复合物,清除血液中流动的蛋白酶2, 还能与细菌内毒素脂多糖,丝裂原ConA、PHA 结合, 通过调节释放其活性; 同时还参与抗原递呈3。因此, α2M 在动物的先天性免疫中起着极其重要的作用4。