适应医学创新人才培养的生物化学实验教学改革初探

生物化学实验教学是医学教育的重要组成部分,为了培养学生的创新思维、科研素质和综合能力,充分调动学生学习的主动性和创造性,最大限度地挖掘学生的学习潜力,作者所在教研室就生化实验课的实验内容、教学方法、实验室的建设和师资队伍的培养等方面进行了改革尝试,获得了很好的实验课教学效果。     

大鼠D-双功能蛋白基因原核表达载体的构建及表达

利用原核表达系统构建大鼠D-双功能蛋白表达载体。设计基因拼接引物,通过RT-PCR合成DBP基因cDNA序列,将酶切、纯化的DBP基因与经相同处理的表达载体pET-28 a相连接,转化感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性重组子。将通过酶切及序列分析鉴定阳性的重组子质粒转入感受态大肠杆菌BL21-gold表达菌中,经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况。结果显示,成功获得了包含DBP基因的双链cDNA序列,酶切、序列分析及Western blotting证实成功构建了DBP基因的原核表达载体。通过原核表达系统,DBP蛋白以包涵体形式产生,复性后可获得高表达的目的蛋白。