同源重组法构建多功能农药降解基因工程菌研究

构建遗传稳定的多功能农药降解基因工程菌可以为农药污染的生物修复提供良好的菌种资源,然而,构建遗传稳定且不带入外源抗性的基因工程菌是一个难点。通过以受体菌的16S rDNA为同源重组指导序列、sacB基因为双交换正筛选标记构建同源重组载体,二亲结合的方法将甲基对硫磷水解酶基因（mpd）整合到呋喃丹降解菌Sphingomonas sp.CDS1染色体的16S rDNA位点,分别成功构建了含1个和2个mpd基因插入到rDNA位点且不带入外源抗性的基因工程菌株CDSmpd和CDS-2mpd。同源重组单交换的效率为3.7×10^－7～6.8×10^－7。通过PCR和Southern杂交的方法验证了同源重组事件。基因工程菌遗传稳定,能同时降解甲基对硫磷和呋喃丹。甲基对硫磷水解酶（MPH）的比活在各生长时期均高于原始出发菌株,比活最高达6.22 mu/μg。     

醒脑静联合高压氧对急性一氧化碳中毒患者脑功能、肝肾功能及血清氧自由基的影响

摘要 目的：探讨醒脑静联合高压氧对急性一氧化碳中毒（ACOP）患者脑功能、肝肾功能及血清氧自由基的影响。方法：选取2017年1月至2020年1月期间我院收治的ACOP患者60例,按照随机数字表法将患者分为对照组（n=30）和研究组（n=30）,在常规治疗的基础上,对照组给予高压氧治疗,研究组给予醒脑静联合高压氧治疗,对比两组疗效、脑功能、肝肾功能、血清氧自由基以及平均苏醒时间、平均住院时间、迟发性脑病发生率。结果：研究组的临床总有效率为93.33%（28/30）,高于对照组的70.00%（21/30）（P<0.05）。两组治疗后天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)均较治疗前下降,且研究组低于对照组（P<0.05）。两组治疗后丙二醛 （MDA）较治疗前下降,且研究组低于对照组（P<0.05）;两组治疗后超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）均较治疗前升高,且研究组高于对照组（P<0.05）。两组治疗后年龄相关性脑白质改变（ARWMC）分级量表、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分均较治疗前下降,且研究组低于对照组（P<0.05）;两组治疗后简易精神状态检查量表(MMSE)评分较治疗前升高,且研究组高于对照组（P<0.05）。研究组平均苏醒时间、平均住院时间均短于对照组,迟发性脑病发生率少于对照组（P<0.05）。结论：醒脑静联合高压氧治疗ACOP患者的疗效显著,有助于患者恢复,可有效清除其血清氧自由基,保护其脑功能、肝肾功能,减少迟发性脑病发生率。