IL-13Rα2介导的毒素融合蛋白在肿瘤治疗中的应用

近年来IL-13受体IL-13Rα2的研究已经成为一个新兴热点,IL-13Rα2在许多肿瘤细胞细胞表面存在特异性高表达,而在正常组织中不表达或表达量很低,通过IL-13Rα2介导的毒素融合蛋白靶向治疗肿瘤也已成为肿瘤诊断和免疫治疗研究中的重要方面。随着对IL-13Rα-结构和功能及其与肿瘤关系研究的不断深入,将为肿瘤的靶向治疗提供新的思路,为肿瘤的临床治疗提供新的理论依据。对IL-13Rα2在不同肿瘤中的表达及IL-13和不同毒素融合得到的毒素融合蛋白在细胞和动物体内等不同水平上对肿瘤治疗的作用做出了相应概括,并对通过IL-13Rα2介导的毒素融合蛋白治疗肿瘤机理的研究以及融合蛋白方法改进及其它相关治疗方法等方面作出综述。     

DEK蛋白的真核表达纯化及其活性检测

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达DEK蛋白并进行纯化。首先以pFastBacI质粒构建重组质粒pFastBacI-DEK,转化DH10Bac大肠杆菌后获得重组穿梭载体Bacmid-DEK,通过脂质体介导转染Sf9细胞产生具有强感染力的重组杆状病毒AcNPV-DEK。用此重组杆状病毒AcNPV-DEK感染Sf9细胞表达His-DEK融合蛋白。在非变性条件下,利用Ni-NTA agarose对表达的His-DEK融合蛋白进行纯化,经SDS-PAGE和Western blotting分析,在50 kDa处出现特异性蛋白条带并证实其为His-DEK融合蛋白。凝胶迁移阻滞实验表明,融合蛋白His-DEK与DNA 的结合具有结构特异性,其与超螺旋型DNA结合活性强于与线性化DNA的结合活性。真核表达并纯化的融合蛋白His-DEK与DNA的结合活性要明显强于原核表达的融合蛋白His-CDB。DEK 蛋白的磷酸化修饰会阻碍其与DNA的结合,而Sf9细胞中表达的融合蛋白His-DEK存在磷酸化修饰,将His-DEK去磷酸化后,其与DNA的结合活性有所提高。     

肝细胞生长因子抑制剂——NK4的抗肿瘤作用

肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor, HGF)是一种多功能的细胞因子,其生物学活性由c-Met蛋白所介导.HGF/c-Met信号通路在肿瘤生成、侵袭、转移以及肿瘤新生血管生成方面起重要促进作用. 因此, HGF/c-Met信号转导通路可以作为抗肿瘤药物设计的靶点.其中,HGF-α链N端447个氨基酸组成的NK4蛋白是HGF的特异性拮抗剂,它不仅通过抑制HGF/c-Met系统的信号转导发挥抗肿瘤效应;而且可以通过拮抗HGF和其它血管生成因子如成纤维细胞生长因子（fibroblast growth factors, FGF)、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF）的活性,进而抑制肿瘤新生血管生成,最终导致肿瘤细胞的凋亡.NK4的这种双重抗肿瘤功能使其成为一类很有前景的新型抗肿瘤药物.本文就NK4对肿瘤的抑制作用及其机制的研究进展进行综述.     

DEK蛋白与细胞凋亡的研究进展

DEK蛋白是一种广泛存在于细胞核内的可磷酸化的核蛋白.研究认为DEK蛋白与DNA的特异性结合能够改变与其结合的DNA的拓扑结构,进而影响基因的活性.细胞应激反应与DEK蛋白有潜在的关系,在死亡受体介导的细胞凋亡过程中,DEK蛋白的磷酸化状态发生了变化.DEK蛋白的磷酸化、多聚腺苷化均能促使DEK蛋白从染色质上释放下来并最终到达细胞外成为导致某些自身免疫性疾病的抗原.近来研究显示,DEK蛋白与细胞凋亡密切相关,DEK蛋白的过表达对细胞凋亡的作用具有双重性,即促进或抑制细胞凋亡.     

以《细胞生物学》课程为依托开展生物学研究生科研素质训练

该文以《细胞生物学》课程为依托开展生物学研究生的科研素质训练,以此为切入点促进生物学硕士研究生创新型人才的培养。我们将科学研究的方法和思路、科研动手能力、学术交流和沟通能力等研究生科研素质的训练融入到《细胞生物学》理论课程和实验课程的教学中,通过PBL教学法、整体实验设计等多种手段结合课程内容对生物学研究生开展全面的科研素质训练,使研究生们能够在入学后尽快掌握科研方法和思路,提高其动手能力、分析能力和表达能力等。实践结果表明,以《细胞生物学》课程为依托开展的研究生科研素质训练是提高生物学研究生人才培养质量的有效途径。     

DEK蛋白C末端DNA结合域的原核表达、纯化及其与DNA的结合活性

DEK蛋白C末端DNA结合域（简称CDB）是近年新发现的一个DEK蛋白与DNA的结合域,其中含有多个磷酸化位点,与DEK蛋白的功能密切相关。利用原核表达系统表达DEK蛋白的CDB肽段并进行纯化,具体为以pET30a（+）为载体质粒,E.coli BL21（DE3）为宿主细胞,构建重组基因工程菌,以IPTG诱导目的蛋白的表达,用NiNTA纯化的重组蛋白样品来进行SDSPAGE电泳分析,约在10.7kDa处出现明显的特征蛋白条带。凝胶迁移分析证实DEK蛋白C末端DNA结合域与DNA的结合倾向于与超螺旋型DNA相结合,同全长的DEK蛋白与DNA的结合具有类似的特点,表明DEK蛋白C末端DNA结合域在DEK蛋白与DNA的结合中可能具有一定的作用。     

间充质干细胞抑制肿瘤细胞增殖机制的研究进展

间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是能够从多种组织来源的基质细胞分离出来的一种具有分化潜能的干细胞,能够分化为脂肪、成骨和软骨细胞等多种组织细胞。研究表明,MSCs对肿瘤细胞具有抑制作用,其作用机制体现在两方面:一方面是通过直接分泌蛋白和微泡来调节肿瘤细胞信号通路和生长所需的因子的表达;另一方面是作为肿瘤靶向药物运输载体,向肿瘤组织输送多种能够抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡的基因或药物。该文针对MSCs对肿瘤细胞的直接和间接抑制机制进行了综述。