肉色杯伞抗炎蛋白的提纯及某些理化性质

通过硫酸铵沉淀和DEAE一Sephadcx A-25柱层析等步骤,从肉色杯伞(Clitocybe geotropa子实体中,获得抗炎蛋白质晶体,纯化后的抗炎蛋白质为针状结晶,平均收率为40 mg／0.5kg．经聚丙烯酰胺盘状电泳鉴定为单一区带,Sephadex G-100柱层析UV 280 nm吸收峰为均一峰形。分子量3万左右。据测定,其N-末端氨基酸为缬氨酸。该蛋白由17种氨基酸按不同比例构成,其中苏氨酸居首位,其次为丝氨酸。此肽不含糖。     

天然麝香抗炎蛋白质的研究Ⅰ.Mu-a-1的分离纯化及其部分性质的鉴定

天然麝香粉(Musk)经乙醚,乙醇脱脂后,再经4℃水冷渗,水提液低温旋转浓缩,冻干,得到的冻干粉先后经过Sephadex G-25,Sephadex G-50,和Sephadex G-100等柱层析,得到抗炎有效部分Mu-a,将此部分再通过DEAE-Sephadex A-25和Sephadex G-150等柱层析,得到一抗炎有效蛋白质,命名为Mu-a-1。经聚丙烯酰胺凝胶电泳及超薄等电聚焦电泳,以高碘酸-schiff试剂及Coomassie R250染色和分子筛层析,均显示一条区带和一均匀吸收峰。以蒽酮试剂法测定Mu-a-1含糖量在40％左右。经氨基酸自动分析仪测定Mu-a-1是由16种氨基酸组成,其中Glu,Asp等酸性氨基酸居多,等电点(PI=3-4),为酸性糖蛋白。最小蛋白质碎片含374个氨基酸残基。用凝胶过滤法估测其分子量在20万左右。药理实验表明Mu-a-1对巴豆油引起小鼠耳部炎症具有明显的抗炎作用,平均7.5mg/kg剂量下,对炎症抑制率为72.3％,P<0.001。