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锯缘青蟹主要过敏原的纯化与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
以锯缘青蟹为研究对象,从免疫鉴定、分离纯化、抗体制备和免疫学分析等方面对其主要过敏原进行研究。首先利用过敏者血清的免疫印迹法,确定锯缘青蟹的主要过敏原为分子量约38kD的蛋白。然后通过制备丙酮粉、等电点沉淀、硫酸铵沉淀及加热处理对分子量为38kD的主要过敏蛋白进行了高度纯化。该蛋白的pI约为4.5,与虾的原肌球蛋白Pena1性质相近,证实了锯缘青蟹的主要过敏原为原肌球蛋白。通过免疫新西兰大白兔,制备了原肌球蛋白的抗血清,采用Protein A Sepharose亲和层析柱对动物抗体进行了纯化。该抗血清效价高,经4×105倍稀释后仍能与抗原进行反应。该抗体与甲壳类动物及软体动物的原肌球蛋白具有较强的免疫交叉反应,可用于食品过敏原检测。
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利用ST细胞研究了甘草酸对猪呼吸道冠状病毒(PRCV)体外复制过程中的抑制作用。通过RT-PCR和Western blot检测发现甘草酸能有效抑制PRCV的体外复制而对ST细胞不引起明显细胞毒作用。抑制效果与甘草酸的剂量成正比关系。PRCV病毒核衣壳蛋白的表达无论在mRNA水平还是在蛋白质水平均随着甘草酸添加量的增加而降低,提示甘草酸是一种有效的抗PRCV药物。 相似文献
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