一株丁二酸产生菌的选育及代谢分析

[目的]了解细胞代谢过程,并最终选育出高产突变株,对丁二酸的工业生物转化有重要意义.[方法]在菌株生化及分子鉴定基础上,讨论了菌株的代谢途径,便于实施有针对性的诱变选育,利用矩阵计算了流量分布以及用扰动法分析了代谢节点.[结果]菌株S.JST经鉴定为产丁二酸放线杆菌,酶活检测表明磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、苹果酸脱氢酶在丁二酸代谢过程中具有较高酶活,出发株的流量分布显示副产物乙醇的流量仅次于丁二酸的流量,选育获得的突变株乙醇脱氧酶酶活显著降低,丁二酸与乙醇的流量分别有34%升高与93%的降低,序列分析发现突变株的乙醇脱氢酶酶基因中存在一个突变位点,且生物信息学表明该位点编码的氨基酸序列与该酶的NADH连接活性有联系.[结论]对产丁二酸放线杆菌采用定向选育的方法能够有效改善细胞代谢,并最终提高丁二酸产量.     

PRDX1、HMGA2、FMNL2在胃癌组织中的表达及与临床病理特征、上皮间充质转化和预后的关系研究

摘要 目的：探讨过氧化物酶1（PRDX1）、高迁移率族蛋白A2（HMGA2）、同源形成素样蛋白2（FMNL2）在胃癌组织中的表达及与临床病理特征、上皮-间充质转化（EMT）和预后的关系。方法：选取2017年1月～2018年2月我院收治的153例胃癌患者,收集术中癌组织和癌旁组织。采用免疫组化法检测PRDX1、HMGA2、FMNL2、波形蛋白（VIM）、上皮细胞钙黏蛋白（E-cad）阳性表达情况,采用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测PRDX1、HMGA2、FMNL2、VIM、E-cad mRNA相对表达量。分析胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2表达与临床病理特征、EMT和预后的关系。结果：与癌旁组织比较,胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2、VIM阳性表达率和mRNA相对表达量升高,E-cad阳性表达率和mRNA相对表达量降低（P＜0.05）。胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2阳性表达率与患者TNM分期、淋巴结转移、远处转移有关（P＜0.05）。Pearson相关性分析结果显示,胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2 mRNA相对表达量与VIM mRNA相对表达量呈正相关（r=0.562、0.517、0.621,P均＜0.05）,与E-cad mRNA相对表达量呈负相关（r=-0.603、-0.544、-0.574,P均＜0.05）。153例胃癌患者术后3年累积生存率为68.44%（106/153）。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,PRDX1、HMGA2、FMNL2阳性组术后3年累积生存率均低于阴性组（P＜0.05）。结论：胃癌组织中PRDX1、HMGA2、FMNL2表达升高,其表达与TNM分期、淋巴结转移、远处转移、EMT以及预后有关,可作为胃癌病情和预后的辅助评估指标。