大熊猫犬瘟热病毒H基因重组山羊痘病毒的构建和鉴定

本研究参照GenBank上已公布的大熊猫犬瘟热病毒(CDV)H编码的基因序列,对其抗原保守结构和识别区域进行修饰,将CDV保护性抗原H基因克隆到pMDTK-pEL载体中,然后运用酶切、连接将表达盒PELH构建到pTK-Eg载体中,从而获得重组转移载体质粒pTK-H-Eg。将重组转移载体质粒pTK-H-Eg与GTPV AV41株共转染BHK细胞,使其在细胞内发生同源重组,获得重组CDV的H基因的山羊痘病毒,然后在Vero细胞上加压筛选,利用gpt培养基筛选到稳定表达EGFP的重组病毒。通过PCR、免疫荧光以及Western Blot鉴定,证明CDV H基因成功构建到GTPV基因组中,并且在细胞中获得了正确表达。本研究获得了表达CDV H基因重组山羊痘病毒,并命名为vpTK-H-Eg。     

RNA实时荧光核酸恒温扩增检测技术 检测解脲脲原体的Meta分析

目的评估RNA实时荧光核酸恒温扩增(simultaneous amplification and testing,SAT)检测技术检测泌尿生殖道拭子及尿液样本中解脲脲原体(Ureaplasma urealyticum,UU)阳性率。方法检索中国学术期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库、维普数据库、PubMed、ScienceDirect和Cochrane图书馆等,收集有关探讨实时荧光核酸恒温扩增检测UU阳性率的所有文献,检索起止时间为1990年1月至2018年8月。拟定入选标准和排除标准,2名研究者分别独立进行文献资料提取及文献质量评估,采用Stata 13.0软件进行Meta分析。结果共检索出57篇文献,依据入选标准和排除标准,纳入了21篇文献进行分析,包含了33 176例尿液及拭子样本量,所有标本均运用实时荧光核酸恒温扩增对检测样本进行UU检测。Meta分析结果显示,实时荧光核酸恒温扩增检测UU阳性率的汇总检出率(95%CI)为0.44 (0.39-0.49)。结论实时荧光核酸恒温扩增检测UU具有快速、灵敏的特点,很好的判断预后效果,适合临床实验室泌尿生殖道患者UU检测,值得临床进一步推广应用。