多倍体银鲫nanos2等位多态性、共线性和表达模式分析

为研究生殖干细胞(Germline stem cells, GSCs)的标记基因nanos2的功能, 在银鲫(Carassius gibelio)中克隆了两个nanos2的同源基因(Homologs), 将其命名为Cgnanos2a和Cgnanos2b, 等位、系统进化树和共线性分析表明, 在银鲫进化历程中发生了额外的两轮多倍化事件, 是一个异源六倍体。qPCR分析表明Cgnanos2a和Cgnanos2b在5月龄银鲫精巢中的表达水平最高, 其次是卵巢; 对在孵化后25—190d的卵巢中的表达动态分析表明, 孵化后25d的卵巢中的Cgnanos2a和Cgnanos2b转录水平最高, 随后表达水平急剧下降; 并且Cgnanos2a和Cgnanos2b呈现出偏向表达的特征。切片RNA原位杂交实验结果表明, Cgnanos2a和Cgnanos2b均特异地在银鲫卵巢邻近生殖上皮的胞囊(Cyst)中一类直径小于20 μm的细胞中表达, Cgnanos2a在精巢精小囊边缘一类单个或两个紧紧相邻的细胞中高表达, 推测是银鲫的GSCs。此外, 还可在精原细胞和初级精母细胞中检测到Cgnanos2a和Cgnanos2b的转录本。研究通过对nanos2阳性细胞的追踪描绘了银鲫卵巢早期胞囊的发育过程, 为后续分离银鲫GSCs奠定了基础; 同时对银鲫nanos2两个歧化的部分同源基因的序列特征、进化及表达特征分析, 为研究鱼类多次多倍化事件后重复基因的进化提供了一个典型例子。