马抗乙型肝炎表面抗原的抗体(抗HBs)的性质及制备方法

本文报告用于放射免疫分析、反向被动血凝等高敏感度检测HBsAg试验的纯抗HBs的制备方法。用HBsAg-抗HBs免疫复合物免疫马匹得到抗HBs血清,其抗HBs效价为1：128—1：256,抗正常人血清蛋白抗体效价为1：64—1：128。用半饱和硫酸铵沉淀法制备得球蛋白部分,通过DEAE-纤维素离子交换层析柱(平衡用0．003M磷酸盐缓冲液,起始pH8.0)后,用聚丙烯酰胺凝腋电泳及免疫电泳检测,证实为单一成份的A峰;马的抗HBs及抗正常人血清蛋白抗体(抗HuSP)主要集中在A峰。将A峰通过偶联正常人血清的亲和层析柱,除尽其中的HuSP,即得到纯的抗HBs。对其中的A峰进行分析定位,表明A峰即马的IgGa亚类。     

制备免疫纯乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的一种综合方法

本文报告包括胃蛋白酶消化、DEAE纤维素离子交换层析、亲和层析、凝肢过滤等四个工序的生产纯HBsAg的综合方法。所得产品经对流电泳、琼脂免疫扩散、免疫电泳等法检查,不含正常人血清蛋白质(HuSP)成份,用来免疫动物可获得不合抗-HuSP高效价的单特异性抗HBs血清,因而证明了它是免疫纯品。本法所需条件一般,而且结果比较稳定。从100毫升HBsAg阳性血清(对流电泳效价1：16)一般可以制得纯HBsAg 13毫升(对流电泳效价1：16,0.3—0.4毫克／毫升),即3．9—5．2毫克。     

马抗乙型肝炎病毒表面抗原抗体的胃蛋白酶消化片段及其性质

在医疗实践中使用动物抗血清作被动免疫已有半个多世纪的历史。早期使用未经提纯的“原制血清”,因此反复注射会引起严重过敏反应。其后,免疫化学家研究了提纯抗体的方法,制出“浓制血清”。1936年发表了胃蛋白酶消化法,制出“精制抗毒素”,大大地减少了过敏反应,因而得以推广并沿用至今。但是在人群中多次使用也还会有人出现过敏反应。近年在国外有减少使用动物抗体,改用高价免疫人血清     

密度梯度区带离心大量提纯乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的研究

文献上通常用于大量制备纯HBsAg的方法为两次氯化铯等比重分带和一次蔗糖速率区带沉降法。但在我们实验中,此法似乎不太理想,因为所得的HBsAg通常含有极微量的正常人血清蛋白。我们采用了一种复合的纯化方法,它包括胃蛋白酶消化、DEAE纤维素层析,氯化铯浮升区带离心及蔗糖速率区带离心。此法可以制出纯HBsAg,其浮密度在氯化铯梯度中为1．1 9—1．23克／厘米’,在蔗糖梯度中为1．15—1．16克／厘米’。在纯化的HEsAg 中未测出正常人血清蛋白,给豚鼠及马匹免疫3—4次可产生单特异抗一lIBs血清,不舍抗正常人抗体,因此纯度较高。电子显微镜观察,可见均匀的小球形颗粒,未见Dane颗粒及杆状颗粒。