高度耐盐双价转基因烟草的研究

随着全球性人口的增长和土地退化的加剧,开发利用广阔盐碱地和干旱土地的需要日益迫切。植物生物技术的日臻完善,为培育高效耐盐植物迎来了一丝曙光。在高渗条件下,耐盐的微生物或植物细胞通过增加胞内一些相溶性溶质的浓度来维持渗透压的平衡。这些可溶性溶质包括无机离子、糖类、多元醇、氨基酸和生物碱等。通过基因工程手段,使细胞内积累脯氮酸⑴、甜菜碱⑵、甘露醇⑶、海藻糖⑷,能够不同程度地提高转基因烟草的耐盐性。多元醇含有多个羟基,亲水性能强,能有效维持细胞内水活度。山梨醇、甘露醇等己糖分子结构、理化性质和生理功能相近。故此．我们认为：不同糖醇在转基因烟草中的积累．可能具有协同(或累加)效应,有希望更大地提高植物耐盐性。我们在获得大肠杆菌mtlD基因(编码l-磷酸甘露醇脱氢酶)和gutD基因(编码6-磷酸山梨醇脱氢酶)克隆⑸的基础上,获得了分别表达mtlD和gutD基因的单价转基因烟草,并首次证实了gucD基因的表达,能显著地提高转基因烟草的耐盐性⑹。本文工作进一步报道同时表达大肠杆菌mtlD和gutD基因双价转基因烟草的高效高度耐盐性。     

Mip1对大鼠心肌细胞凋亡基因Bid转录调控作用的初探

目的:研究转录因子Mip1对大鼠心肌细胞H9C2凋亡相关基因Bid的转录调控作用.方法:以H9C2细胞基因组DNA为模板,扩增Bid核心启动子片段,将其克隆入荧光素酶报告基因质粒PGL3-Basic中,构建重组载体,并采用双酶切法、PCR法及基因测序对其进行鉴定.用脂质体转染法将该载体转入Mip1不同程度过表达的H9C2细胞,检测该细胞Bid基因启动子区的转录活性.结果:成功克隆Bid基因启动子区,双酶切、PCR和基因测序均显示PGL3-Basic-Bid promoter重组载体构建成功.荧光素酶相对活性检测显示在H9C2细胞中,随着Mip1转入的增多,Bid启动子区转录活性逐渐下降.结论:Mip1作为一个新的转录抑制因子,可以下调凋亡基因Bid的转录.     

邻羟基苯甲醇在田间对棉铃虫的引诱作用

利用杨树枝把诱蛾技术在田间诱杀棉铃虫Ｈｅｌｉｃｏｖｅｒｐａａｒｍｉｇｅｒａ (Ｈ櫣ｂｎｅｒ)在我国已经有半个多世纪的历史。田间应用结果表明 ,用不同树种制作的树枝把对棉铃虫成虫均有较好的诱集效果[1] 。作者的室内研究结果表明 ,在长江中下游流域制作树枝把的主要树种     

甜樱桃对^15N尿素的吸收、分配和利用特性

以5年生‘早大果’甜樱桃为试材,研究了其在萌芽前土施^15N尿素的吸收、分配和利用特性.结果表明：植株器官从肥料中吸收分配到的^15N量对该器官全氮量的贡献率（Ndff）均随时间推移逐渐升高,盛花期细根和贮藏器官的Ndff较高;果实硬核期,新生器官中长梢和长梢叶的Ndff增长迅速,分别达0.72%和0.59%;果实硬核期到采收期,果实的Ndff增长迅速,到采收期达到最高,为1.78%;果实采收后到花芽分化期,新生器官Ndff增长减慢而贮藏器官增长迅速.盛花期根系吸收的氮素首先分配到贮藏器官,粗根^15N分配率最高,为54.91%;果实硬核期细根和贮藏器官^15N分配率由盛花期的85.43%下降到55.11%,而地上部新生器官则升高至44.89%;果实采收期^15N分配率变化不大,果实采收后氮素营养迅速向贮藏器官中运转,花芽分化期细根和贮藏器官的^15N分配率升高至72.26%,而地上部新生器官^15N分配率与采收期相比下降了19.31%.从盛花期到花芽分化期,植株对^15N尿素的当季利用率呈升高趋势,于花芽分化期达到最高,为16.86%.     

单克隆抗体的制备及其应用价值

1984年诺贝尔医学奖授予了单克隆抗体制备的首创者Kohler和Milstein。他们于1975年利用了细胞融合技术获得了第一株能分泌抗羊红血球单克隆抗体的杂交瘤,并预言了这种技术在医学和工业生产方面的应用价值。这一技术是七十年代在免疫学领域中一大成就,然而却使整个医学生物学得益。这一技术在不到十年的发展和应用中,已展现了它巨大的应用价值和无比广阔的前景。单克隆抗体根据Burnet的关于抗体形成的克隆选择学     

《生物工程讲座》(Ⅵ)——细胞工程(二)淋巴细胞杂交瘤及其应用

自1970年代中后期首先在美国掀起的生物工程的热浪今天正席卷着全世界。作为生物工程主体之一的细胞工程,由于淋巴细胞杂交瘤和单克隆抗体的产生和发展,也在迅速崛起。细胞工程所涉及的内容很广,包括细胞培养,细胞拼合,细胞融合,染色体导入和基因转移等等,难以下一个确切的定义。一般说来,它是借助于细胞生物学和分子生物学方法,通过现代工程技术设计手段,按着人类意图,有目的地培养,改造或重建细胞,以期获得具有人类所需要的、某些特性或功能的细胞,及其产品的具有工艺性质的一门生物技术科学。所以细胞工程决     

不同提取方法及上样量对牡丹试管苗茎基部蛋白双向电泳的影响

为建立一套适合于牡丹试管苗茎基部蛋白的双向电泳技术,以便更好地利用蛋白质组技术研究牡丹试管苗不定根的发生机理,本研究比较了三种不同蛋白质提取方法对双向电泳结果的影响,并在蛋白质上样量方面进行了比较。结果表明,乙酸铵/甲醇酚提取法所得2-DE图谱的蛋白点很少,仅检测到45个,且较模糊,有明显的拖尾现象,分辨率很低;乙醇/乙醚丙酮法所得的蛋白点也较少(101个),较模糊,且横竖纹干扰较大;三氯乙酸/丙酮法所得蛋白点数较多,可检测到434个清晰的蛋白点,且形状规则,重复性好,适合后续分析,操作也较为简便。用三氯乙酸/丙酮法提取蛋白,采用800μg、1000μg和1200μg三个不同的上样量进行双向电泳,在上样量为1200μg时(IPGpH3～10,24cm),蛋白质在12%SDS-PAGE胶上得到了较好的分离,在2-DE图谱上可分辨出562个蛋白点。因此,三氯乙酸/丙酮法是较适合于牡丹试管苗茎基部蛋白质提取的方法,1200μg是较为合适的上样量。     

转基因烟草的甘露醇合成和耐盐性

土壤的盐碱性是世界许多地区限制植物生长和作物产量的主要制约因素。长期的研究发现:在高盐或干旱环境下,大多数植物在细胞质中开始积累一些低分子量的代谢物,如脯氨酸、甜菜碱、糖醇等。这些物质通过维持高的细胞质渗透压,有利于植物在高盐或干旱条件下的水分吸收。通过基因工程手段,影响或改变植物体内的生理代谢途径,使得植物细胞产生和积累不同的低分子量有机化合物,能够