瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因的分离与鉴定

将在木聚糖上生长的瑞氏木霉(Trichoderma reesei)RutC-30的cDNA文库全部质粒转化已携带有毕赤氏酵(Pithia stipitis)木糖还原酶基因的重组酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)菌株H475,在H475中构建了瑞氏木霉的cDNA表达亚文库。在以木糖为唯一碳源的选择性酵母合成培养基上,从该亚文库中筛选到瑞氏木霉木糖醇脱氢酶cDNA基因．该基因片段长为1．3kb。Southern、Norhern印迹杂交分析和蛋白质凝胶电泳结果表明该基因确实来源于瑞氏木霉,所编码蛋白质分子量约为40kDa。携带有毕赤氏酵母木糖还原酶和瑞氏木霉木糖醇脱氢酶基因的重组酵母能够在以木糖为唯一碳源的培养基上生长,并能将90％以上的木糖转化为木糖醇、乙醇和其它副产品。     

纤维素酶纤维素吸附区的结构与功能

大多数纤维素酶含有催化区和可与纤维素结合且氨基酸序列较为保守的纤维素吸附区（ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｂｉｎｄｉｎｇ ｄｏｍａｉｎ,ＣＢＤ）。纤维毒品及附区促进酶与底物的结合,有利于催化区以对溶性底物的作用,但对可溶性底物的催化作用无影响。对ＣＢＤ结构的研究和进一步的诱变研究揭示。纤维素吸附区是通过几个芳香族氨基酸结合到纤维素表面。有实验证明外切莆聚糖酶的ＣＢＤ对结晶纤维素有疏解作用。ＣＢＤ结构域已居功     

具有高外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅰ活力的新型黄单胞工程菌的构建

由广宿主质粒pRK404和微紫青霉外切葡聚糖纤维二糖水解酶Ⅰ(CBHI)c DNA基因cbhⅠ构建了重组质粒pRK404-181,在携带有诱动质粒的菌株ED86 54(pRK2013)的存在下, 采用三亲滤膜结合的方法,将该质粒转移到野油菜黄单胞菌S-152中,并成功地得到表达。结合子S-152(pRK404-181)外切葡聚糖纤维二糖水解酶的pNPC活力比原始菌株S-152提高了2-4倍,滤纸酶活提高了1倍。 Abstract:Recombinant plasmid pRK404-181 was constructed with the wide-host-range plasmid pRK404 and the cellubiohydrolase I(cbh I)gene of Penicillium janthinellum.The plasmid was transferred into Xanthomonas campestris S-152 with the aid of helper plasmid pRK2013.As a result,the intracellular collubiohydrolase activity of S-152(pPK404-181)increased 2~4 time,and the filter paper degrading activity increased 1 time in comparison with the initial bacterial Xanthomonas campestris S-152.