烷化溶血磷脂对U266 细胞作用的实验研究

为研究烷化溶血磷脂(ET—18-OCH3)对骨髓瘤细胞系U266的体外杀伤作用。通过台盼蓝拒染法和克隆形成率来反映ET—18-OCH3对U266细胞的抗增殖效应;通过荧光显微镜、电镜观察细胞形态学变化,琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解片段,流式细胞仪作DNA倍体分析来观察ET—18-OCH3诱导U266细胞凋亡的作用;通过RT—PCR检测bcl-2、c—myc mRNA水平,流式细胞仪检测Bcl-2、C—myc蛋白的表达来初步探讨其相关的作用机制。结果显示．U266细胞经ET—18-OCH3处理后细胞生长明显受抑,呈时间和剂量依赖性;荧光显微镜,电镜下观察均可见凋亡形态学改变,7．5μg／ml ET—18-OCH3作用24小时后出现典型的DNA降解片段。流式细胞仪检测凋亡率为17．53％;RT—PCR显示bcl-2、c-myc mRNA表达均随ET—18-OCH3作用时间的增加而减弱,ET—18-OCH3作用24小时后,bcl-2、c—myc mRNA分别减少了86％、72％;流式细胞仪检测Bcl-2蛋白、C-myc蛋白分别减少了原来的17％、60％。研究结果表明,ET—18-OCH3对U266细胞的生长具有明显的抑制作用,并可诱导细胞的凋亡,具有明显的抗肿瘤效应。