保健食品双歧杆菌和乳酸菌计数方法的优化

目的通过稀释液和培养基的选择对保健食品双歧杆菌和乳酸菌计数方法进行优化。方法对2个品种6个批次的益生菌类保健食品,分别采用2种稀释液和3种培养基进行双歧杆菌和乳酸菌计数,并比较结果。结果选择CYS缓冲液为最优稀释液,M-TOS培养基为双歧杆菌计数的最优培养基,BBL培养基为乳酸菌总数计数的最优培养基。结论优化方法所得菌数均明显优于国标方法,可以用于保健食品的双歧杆菌和乳酸菌计数。     

中国木薯醇腈酶在汉逊酵母中的表达

α-醇腈酶(α-hydroxynitrilelyase, HNL)是手性醇腈化合物生物合成十分有用的工具, 能够催化羰基化合物和HCN立体选择性的加工形成手性醇腈化合物。应用PCR扩增得到HNL基因, 连接到pMD18-T 中进行测序, 然后通过EcoRⅠ和NotⅠ将其连接到汉逊酵母表达载体pHMOXGαA中。通过在含有4 mg/mL的G418的YPD培养基上进行筛选获得阳性重组子, 用0.5%的甲醇诱导96 h。酶活测定和SDS-PAGE分析显示HNL在汉逊酵母NCYC495(leu1.1)中得到正确表达, 每毫升发酵液中获得2.015 U的醇腈酶。