三种连接子多肽对抗癌融合蛋白翻译后剪切效果比较研究

IL-24和Smac为靶向癌症的多基因治疗研究中重要的候选基因.在构建IL-24和Smac双基因表达载体过程中,选择一个稳定高效的连接子非常关键.利用三个不同的连接子多肽序列IETD、EEED、F2A构建三个真核表达质粒pcDNA3.1(+)-IL-24-IETD-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-EEED-Smac、pcDNA3.1(+)-IL-24-F2A-Smac,并联合5-氟尿嘧啶(5-FU)处理研究各连接子介导的融合蛋白剪切效果.上述实验结果表明,在三种IL-24-linker-Smac双基因表达载体中,F2A连接子剪切效果最佳且与caspase活性成正相关.IETD、EEED连接子介导的融合蛋白都有一定的剪切,但IETD/EEED多肽影响了上游IL-24蛋白的半衰期,加速了剪切后IL-24蛋白的泛素化降解.本研究为构建靶向癌症应用的双基因或多基因载体提供了设计参考.     

硫利达嗪联合溶瘤腺病毒ZD55-TRAIL对HeLa细胞抑制作用及其机制探讨

靶向基因-病毒治疗方法是近年来产生的一种较为有效的癌症生物治疗方法。但其癌症治疗效果仍需进一步提高。在该研究工作中,通过联合使用临床神经治疗药物硫利达嗪（thior_idazine）与溶瘤腺病毒ZD55-TRAIL来增强对HeLa细胞的杀伤作用。通过MTT实验、倒置显微镜观察、结晶紫染色实验观察了联合使用thioridazine和ZD55-TRAIL对子宫颈癌细胞株HeLa细胞的毒性作用;使用Hoechst33342染色、流式细胞实验和Western blot实验检测了联合使用thioridazine和ZD55-TRAIL在引起HeLa细胞发生凋亡上的作用。结果表明,小分子药物thioridazine与病毒ZD55-TRAIL联合使用可以增强对HeLa细胞的杀伤作用,通过下调抗凋亡蛋白XIAP的水平,更显著地促进HeLa细胞发生凋亡。该研究首次报道了联合使用精神疾病药物thioridazine和ZD55-TRAIL对子宫颈癌细胞HeLa的抑制作用,可能是子宫颈癌治疗的一种有效方法。