蝮蛇毒碱性磷脂酶A_2基因的克隆

从蝮蛇毒腺中抽提总ＲＮＡ．利用人工合成寡核苷酸引物作逆转录,以ｃＤＮＡ为模板进行体外扩增,获得磷脂酶Ａ２（简称ＰＬＡ２）基因,克隆至ｐＢＳ－ｋｓ载体中。通过对３个碱性ＰＬＡ２（简称ＢＰＬＡ２）基因单独克隆分别作ＤＮＡ全序列分析,推导ｐｒｏ－ＢＰＬＡ２由１３８个氨基酸残基构成,与已测定的部分氨基酸序列比较,基本相符。该基因成功的克隆,不仅推导出ＢＰＬＡ２的蛋白质全序列,也为进一步开展蛇毒功能肽蛋白质工程的研究工作打下了良好的基础。     

中华眼镜蛇神经毒素cDNA的克隆及表达

通过ＲＴ－ＰＣＲ的方法,从广西产中华眼镜蛇总ＲＮＡ中克隆到３个新的神经毒素ｃＤＮＡ序列,命名为ＮＬ１、ＮＬ２和ＮＬ３。它们编码的蛋白质序列与台湾眼镜蛇神经毒素ｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ的同源性分别为７７％、７２％和９８％,均具有维持ｃｏｂｒｏｔｏｘｉｎ结构与功能必需的残基Ｔｙｒ＾２５、Ｌｙｓ＾２７、Ｔｒｐ＾２９、Ａｒｇ＾３３和Ｌｙｓ＾４７。ＮＬ３克隆于ｐＥＴ２８ｂ＋表达载体内,转化至ＢＬ２１（ＤＥ３）中     

乙肝表面抗原专一的单链嵌合抗体在大肠杆菌中的表达

利用重组ＰＣＲ技术将乙肝表面抗原专一单抗的Ｖｋ与人源的Ｃ基因拼接成轻链嵌合抗体Ｖ－Ｃ,再通过编码柔性肽段（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）的Ｌｉｎｋｅｒ与Ｖ连接成单链嵌合抗体ＳｃＦＶ－Ｃ,并分别在大肠杆菌的热敏与分泌型表达系统中进行表达。表达产物的Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ与间接ＥＬＩＳＡ检测结果表明,ＳＣＦｖ－Ｃ产两种系统中的表达产物均具有抗原结合活性,并已在分泌肽的指导下ＳｃＦｖ－Ｃｋ能被Ｅ．ｃｏｌｉ分泌出胞外。     

尖吻蝮蛇毒磷脂酶A2基因的克隆与序列分析

从尖吻蝮蛇毒腺中抽提总ＲＮＡ,经ＲＴＰＣＲ扩增磷脂酶Ａ２的基因,以江浙蝮蛇的酸性磷脂酶Ａ２基因为探针杂交筛选克隆,分离得到４种磷脂酶Ａ２基因。经双向测序测定了这些磷脂酶Ａ２同功酶基因的全序列,并由此推导出编码的氨基酸序列。运用计算机软件推算了它们的等电点,按照等电点和结构特征将它们分别命名为尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２Ｉ（Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ）、尖吻蝮蛇毒酸性磷脂酶Ａ２ＩＩ（Ａ．ａＡＰＬＡ２ＩＩ）、尖吻蝮蛇毒碱性磷脂酶Ａ２（Ａ．ａＢＰＬＡ２）和尖吻蝮蛇毒Ｌｙｓ４９磷脂酶Ａ２（Ａ．ａＬｙｓ４９ＰＬＡ２）。其中Ａ．ａＡＰＬＡ２Ｉ的１～１０位氨基酸残基序列同以前分离得到的尖吻蝮蛇酸性磷脂酶Ａ２已测定的１～１０位氨基酸残基序列完全一致。Ａ．ａＬｙｓ４９ＰＬＡ２基因则由于其推导出的４９位氨基酸残基由Ｌｙｓ代替了Ａｓｐ而区别于以前克隆到的磷脂酶Ａ２基因。最后运用计算机软件比较了它们的同源性。这一组磷脂酶Ａ２基因的克隆,将为进一步研究磷脂酶Ａ２的结构与功能的关系提供更多的信息。     

半拍机制—生物进化规律的一点探讨

动物进化总是半拍、半拍的进行。任何新结构的出现(系统、器官、组织等),总是最低等的、最简单的、最不完善的,其功能也是最低下的,有待进一步进化(即从无→雏形→不发达→发达),如心脏、脑等。     

江浙蝮蛇磷脂酶A2基因的多样性研究

我们利用简并引物从江浙蝮蛇腺总ＲＮＡ经ＲＰ－ＰＣＲ扩增磷脂酶Ａ２（简称ＰＬＡ２）基因,并以碱性ＰＬＡ２（Ｂ－ＰＬＡ２）基因为探针,分离出了酸性ＰＬＡ２（Ａ－ＰＬＡ２）和两个未见报道的特征结构类同的基因,分别命名为Ａｓｎ＾４８－ＰＡＬ２和ＢＡ－ＰＡＬ２。双向测序测定了这组ＰＬＡ２同工酶（除信号肽外）基因的全序列,并由此推导编码的氨基酸序列。其中Ａ－ＰＬＡ２基因编码的氨基酸序列与较早报道的由蛇毒中分离     

血压控制系统中压力感受器反馈回路的研究

应用控制系统分析方法研究血压调节已进行了大量的工作,并对深入研究血压调节与控制的原理提供了许多有价值的结果。现已了解,控制人体血压稳定的主要有9个子系统,就其功能而言,这些子系统又可分成快速比例型控制和慢速积分型控制两大类。在快速比例控制作用中,动脉压力感受器反馈回路起着格外重要的作用,这个回路是一个比较典型的负反馈控制系统,它具有多输入、多输     

松嫩盐碱草地西部的植物群落特征与土壤因子动态关系分析

应用逐步回归法,分析了5~9月松嫩盐碱草地植物群落的生物量、丰富度、多样性和均匀度与同月土壤因子间的关系。松嫩盐碱草地植物群落特征受若干土壤因子的共同影响,不同月份影响因子的变化较复杂。5~7月土壤盐分和养分共同影响着松嫩盐碱草地植物群落生物量,但是土壤盐分因子与群落生物量的相关性更明显（5月的Ca²⁺质量分数,6月和7月的Mg²⁺质量分数）。土壤盐分因子在整个生长季内对松嫩盐碱草地植物群落生物量的直接作用都大于土壤养分因子的。6月时影响松嫩盐碱草地植物群落丰富度、Simpson指数和Shannon指数的土壤养分因子增加,其中土壤全氮质量分数的直接作用是所有土壤因子中最大的。8月植物群落生物量、Simpson指数和Shannon指数仅受土壤盐分因子影响,其中生物量与土壤pH值以及Simpson指数与土壤碱化度都是极显著负相关,Shannon指数与土壤含盐量显著负相关。6~9月的松嫩盐碱草地植物群落均匀度也同时受土壤养分和盐分因子的作用,其中6月和9月时土壤盐分因子对群落均匀度的直接作用更突出。生长末期（9月）松嫩盐碱草地植物群落生物量与土壤因子间的关系以及生长初期（5月）植物群落均匀度与土壤因子间的关系都不明显。     

蝮蛇毒碱性磷酯酶A2基因的克隆

从蝮蛇毒腺中抽提总ＲＮＡ。利用人工合成寡核苷酸引物作逆转录,以ｃＤＮＡ为模板进行体外扩增,获得磷脂酶Ａ２基因。克隆至ｐＢＳ－ｋｓ载体中。通过对３个碱性ＰＬＡ２基因单克隆分别作ＤＮＡ作全序列分析,推ｐｒｏ－ＢＰＬＡ２由１３８个氨基酸残琪构成,已测定的部分氨基酸序列比较,基本相符。