临床微生物学检验课程创新性教学设计与思考

临床微生物学检验是医学检验技术专业核心课程之一,在医学检验人才培养中具有重要地位。本课程存在内容多、课时少的矛盾,为了系统而又重点突出地讲授本学科的基础理论和发展动态,有必要构建符合实际的课程体系,重组并优化课程设计。本文从教学定位分析、教学实施设计以及教学评价设计三个方面探讨本课程创新性教学设计的实践经验与认识,并深入解析其课程体系建设意义,为今后临床微生物学检验的教学方法改革提供思路,以达到"厚基础、强能力、高素质、重应用"的人才培养目标,并为培养能够主动获取知识及富有创新能力的高素质的医学检验人才奠定基础。     

手机触屏多重耐药菌的分离鉴定

目的 明确手机触屏的菌群分布,对耐药菌株进行分型鉴定,指导触屏手机的正确清洁、使用方式。方法 对20名在校学生与20名医护人员手机触屏进行采样、增菌培养,以等面积电梯按钮作为对照组。使用药敏试验筛选对普通抗生素有耐药能力的菌株,对其进行克隆测序、PCR耐药位点检测和生化检测,鉴定具有耐药性细菌的种类。结果 医护人员手机触屏菌液浓度和菌落数与对照组间差异有统计学意义(t=2.281,P0.05;t=2.185,P0.05),在校学生组与医护人员组以及对照组间差异无统计学意义;在校学生组与医护人员组均分离出具有多重耐药的菌株——铜绿假单胞菌。结论 手机屏幕表面存在多种细菌,经鉴定大多为大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌和草绿色链球菌等,同时存在多重耐药性铜绿假单胞菌,定期对手机触屏进行清洁消毒势在必行。     

细菌纤维素的合成与调控进展

细菌纤维素是1种天然的高纯度生物多聚物,与木质纤维素相比,其生产和加工过程更为方便和环保,因此已成为1种极有潜力的生物材料。葡糖酸醋杆菌是目前已知的产纤维素能力最高的菌株。综述了葡糖酸醋杆菌的细菌纤维素合成和调控机制以及为提高产量所进行的基因工程手段和培养方法。     

表达淀粉酶、糖化酶葡糖酸醋杆菌工程菌的构建

采用基因融合技术,将葡糖酸醋杆菌Gluconacetobacter hansenii ATCC23769分泌蛋白CMCax的信号肽序列分别与来源于枯草芽胞杆菌的淀粉酶基因、黑曲霉的糖化酶基因融合构建融合蛋白,连入能在G.hansenii ATCC23769自主复制的载体pbs-H1S中,电击转入G.hansenii ATCC23769,构建能内源表达淀粉酶、糖化酶,以及淀粉酶-糖化酶的葡糖酸醋杆菌。淀粉平板透明圈检测结果和DNS测酶活结果显示,构建的3种工程菌能成功表达并分泌淀粉酶和糖化酶。     

基于ERIC-PCR指纹图谱技术的小鼠肠道菌群失调分析方法的建立

目的采用常规菌群分析方法和ERIC-PCR技术对正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠模型分别进行肠道菌群检测,结合细菌培养和DNA指纹图谱检测结果分析小鼠肠道内主导菌群数量和种类的改变情况,建立利用ERIC-PCR技术分析小鼠肠道菌群失调的检测方法。方法先利用常规菌群分析方法鉴定正常小鼠和抗生素相关性腹泻小鼠的菌群状况,再提取其基因组DNA,最后以肠杆菌科基因间重复序列(ERIC)为模板,利用ERIC-PCR方法获得正常小鼠和模型小鼠的肠道菌群指纹图谱,与常规菌群分析结果作比较,验证ERIC-PCR技术的准确性。结果常规菌群分析结果表明四种优势菌群在数量上出现明显的变化,证实造模成功。经ERIC-PCR技术成功获得两组小鼠粪便基因组DNA图谱,两组间呈现具有一定对比性的特异性指纹图谱。结论从小鼠粪便基因组经ERIC-PCR后的图谱中特异性条带的分布、数目和亮度来看,能说明肠道菌群的分布状况存在明显差异,结合常规菌群分析方法作对比,说明ERIC-PCR技术是一种分析小鼠肠道菌群失调高效快捷的检测方法。     

初发2型糖尿病患者汗腺功能病变与局部菌群的变化

目的通过对初发2型糖尿病(T2DM)患者汗腺功能及相应部位菌群分布的测定,揭示初发T2DM早期泌汗功能异常时的微生态环境改变情况。方法利用碘-淀粉显色法于手部虎口处测定初发T2DM患者与对照组汗腺功能,使用图像分析软件Image Pro Plus定量统计分析;同时利用质谱技术(MALDI-TOF)检测汗腺测定相应部位的体表菌群。结果初发T2DM组和对照组汗腺功能在检测的30 s、60 s和120 s差异均存在统计学意义,T2DM组泌汗功能强于对照组(t=3.236、20.600、2.693,均P0.05),且女性患者泌汗功能略强于男性患者;初发T2DM组虎口处葡萄球菌检出率与对照组比较差异无统计学意义,痤疮丙酸杆菌、铜绿假单胞菌出现概率较高,与对照组相比差异存在统计学意义(χ~2=5.610、4.381,均P0.05)。结论 T2DM早期诊断患者存在泌汗功能异常;泌汗功能异常的同时,汗腺分布部位局部菌群分布也存在变化,具体相互关联机制需要进一步研究。     

肠道菌群对2型糖尿病的调节机制

2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)是一种遗传和环境因素共同作用的复杂的代谢性疾病,约占糖尿病患者总数的90％以上。以往,人们一直认为导致T2DM发生的肥胖是外部因素所致,但目前已有证据表明,身体内部因素同样是导致肥胖的诱因之一。人体微生物群的最新研究表明,个体肠道中的特定菌群可能促进肥胖、炎症或胰岛素抵抗的发生,最终诱发T2DM。这使得肠道菌群及其在T2DM中的作用以及肠道益生菌的潜在治疗价值成为T2DM领域中的一个重要研究方向。本综述旨在通过研究健康人群和T2DM患者肠道菌群的分布,探讨肠道菌群与T2DM的相互作用及调节机制。