YPS1/YPS2失活改进酿酒酵母An-α菌株β-葡萄糖苷酶分泌表达

[背景] 工业酵母菌株的蛋白质表达通常存在表达量低、分泌效率低的问题。[目的] 考察失活Yapsin蛋白酶Yps1p和Yps2p对β-葡萄糖苷酶在酿酒酵母An-α菌株中表达的影响。[方法] 利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,首先构建得到未折叠蛋白响应（Unfolded Protein Response,UPR）指示菌株An-α（leu2：：UPRE-lacZ）即An-αL,然后分别失活其YPS1和YPS2基因,导入以YEplac195为载体的β-葡萄糖苷酶表达质粒（简称BG）,进行生长和酶活分析评价。[结果] 菌株An-αL的YPS1和YPS2基因失活对其在酵母浸出粉胨葡萄糖（Yeast Extract Peptone Dextrose,YPD）培养基中的生长未造成明显的不利影响;导入质粒BG后将在酵母浸出粉胨纤维二糖（Yeast Extract Peptone Cellobiose,YPC）培养基中生长的最大OD₆₀₀分别提高了21.9%和7.4%;最大总酶活值为0.087 5和0.068 6 U/（mL·OD₆₀₀）,是对照菌株相应值的2.268倍和1.778倍;分泌比例提高了19.4%和22.2%;β-葡萄糖苷酶表达水平与β-半乳糖苷酶酶活水平所代表的UPR信号响应值之间呈现良好的相关性。[结论] YPS1和YPS2基因失活有助于改进酿酒酵母An-α菌株中β-葡萄糖苷酶的分泌表达。     

白介素19(IL-19)

白介素-10(IL-10)是一种具有重要免疫调节功能的多效性细胞因子,它能影响免疫系统中多种类型细胞的活性。新近,美英科学家克隆了一种独特的人mRNA,它编码名为白介素19(Interleukin-19,IL-19)的新型IL-10同源物。IL-19基因邻近IL-10基因,都位于1号染色体上。IL-19基因由5个外显子和4个内含子组成,由二种不同的启动子转录。IL-19与IL-10有21％aa同源。IL-19mRNA是在活化的巨噬细胞中发现的,其表达相似而又不同于IL-10。IL-19与IL-10的序列比较表明两者不可能共享一种受体。IL-19的鉴定增加了已鉴定的IL-10同源物数并证明了IL-10相关蛋白家族的存在。在活化的巨噬细胞中,IL-19的表达模式不同于IL-10,并且可能通过不同于典型的IL-10受体复合物的不同受体进行信号转导。 [黄仕和译自Gallgaher G et al．Immunol Letters,2000,73(2,3)：206]     

UPRE-lac Z为报告基因评价酵母UPR响应初步研究 *

目的: 未折叠蛋白质反应UPR是酵母最重要蛋白质质量控制机制之一,研究UPR响应规律有助于优化异源蛋白分泌途径合成和应对酸醇等胁迫因子的细胞自我保护。方法: 选择实验室菌株W303-1A和工业菌株An-a,以UPRE启动子控制下的Lac Z为报告基因,利用CRISPR/Cas9技术构建得到指示菌株W303-1A (leu 2::UPRE-lac Z)和An-a (leu 2::UPRE- lac Z),分别简称WZ和AZ。结果: 生长曲线测定显示WZ和AZ与亲本菌株的生长接近;添加下述试剂孵育4h后测定β-半乳糖苷酶酶活:1μg/ml衣霉素、8%(v/v)乙醇、0.3%(v/v)乙酸、5%(v/v)乙醇+0.1%(v/v)乙酸;菌株AZ的比酶活分别是对照值的8.2、26.4、1.1和7.9倍,而菌株WZ则分别为12.6、2.4、1.0和1.0倍;进一步以YEplac195为载体表达β-葡萄糖苷酶,AZ和WZ转化子在2%纤维二糖中生长24h的β-葡萄糖苷酶酶活值分别为0.35和6.12U/ml,相应的LacZ则分别为对照值的3.1和5.4倍。结论: 两个菌株显示了在抑制物和异源蛋白表达UPR响应和调控能力上的显著差异,为其改造利用提供了方向;研究也为分析抑制物耐受性和异源蛋白表达关键制约因素、优化酵母ER和UPR信号通路的调控奠定了初步方法基础。     

皇冠鬣蜥的水上绝技

绝大多数的脊椎动物,本事再大也不能在水面上奔跑。但皇冠鬣蜥却有这功夫。皇冠鬣蜥是栖息在中美洲和南美洲热带雨林的一种小型蜥蜴,成蜥重９０克（不到２市两）左右,小蜥仅重２克。皇冠鬣蜥生活在靠近河溪和水塘的地方。平时四脚爬行,一旦受惊,能用后脚飞快地在水上奔跑而不会沉下去。有了这一祖传绝技,它们轻易地甩掉追兵,从而化险为夷,保住自己的性命。据研究,皇冠鬣蜥之所以能在水上奔跑,是因为它身体轻盈且脚步快速之故。它右脚踩上水之前,左脚已经迈出;而左脚踩上水之前,右脚已先迈出。此外,皇冠鬣蜥的脚上还有点儿小名…     

湖北远安，苟家垭化石一条街

远安县西部重镇苟家垭有一条著名的明清老街 ,铺砌老街路面的石灰岩表面 ,呈现出许多竹笋般的古生物化石 ,故又称化石街。铺筑路面的石灰岩是距今４亿多年前的中奥陶统“宝塔灰岩”地层 ,其中含有难以数清的震旦角石化石 ,有分散的个体和集中的群体 ,有的为火箭或竹笋状完整单体 ,有的是其纵切面或横切面 ,内部隔壁构造清晰可见。震旦角石属软体动物门 ,头足纲 ,具有钙质外壳 ,外形如火箭锥体 ,柔软的肉体居于壳体前端 ,用鳃呼吸。因头部有环状分布的触手 ,触手具有手、足的功能 ,用以捕食、爬行和游泳 ,故名头足类。它们全都生活于古海洋 ,…     

印度生物技术市场快速增长

Asia-Pacific Biotech News 2000年9月4日号报道：印度生物技术产品市场将从1997-1998年的5亿美元增长到2001年的25亿美元。人类健康的生物技术产品市场份额将达到15亿美元,或者说将增长60%。农业和兽医产品将增长15%,医药设备和R—D将保持25%的增长率。